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- 2019-09-21 发布于湖北
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黄曲霉毒素B1检测试剂盒操作方法2/50 ppb
一、样品的准备/萃取
1. 获取具有代表性的样品,使用Romer 系列II型研磨机研磨,使至少95%的研磨样品能够通过20目筛网,彻底混合并对样品进行二次取样。
2. 称取4g 研磨样品于干净并可密封的广口瓶中。加入20mL 70/30(v/v)甲醇/水萃取溶液并密封广口瓶。注意:样品与萃取溶液比例应为1:5(w:v), 振荡或均质3分钟。
3. 静置样品,用滤纸过滤萃取上清液,收集待检滤液。
4. 用提供的分析缓冲液对滤液进行1:2稀释。例如,将50μL待检滤液加入50μL分析缓冲液中,混匀准备进行随后检测。
二、检测步骤
1. 将适量的标记颜色的稀释孔条放入微孔板架上,稀释条孔的数目需使每个标准品(0, 2, 5, 20 50ppb)或样品能够对应一个稀释孔。
2. 将等量的有抗体包被的微孔条放入微孔板架上,未使用的有抗体包被的微孔条需放回装有干燥剂的原铝箔袋内并密封保存。
3. 按照240 μL/孔或2 mL/条的体积计算所需的酶联偶合物用量。从绿色瓶盖的瓶中量取所需用量的酶联偶合物至一个酶联偶合物试剂槽中(如多道移液器所用的试剂槽)。使用8道移液枪移取100μL酶联偶合物至每个稀释孔中。
4. 使用单道移液枪,移取50μL标准品和样品至已装有100μL酶联偶合物的稀释孔中。用移液枪反复吸送3次以充分混合孔中液体。每当移
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