第五章微生物的营养和培养基.pptVIP

第五章 微生物的营养和培养基 主要内容: 介绍各种微生物的营养类型、各种营养物质在微生物生命活动中的功能及其进入细胞的方式；掌握培养基的定义、分类、配制原则与方法。重点各种营养物质在微生物生命活动中的功能；选择和配制培养基的方法。 5.1 微生物细胞的化学组成和营养要求 5.1.1 微生物细胞的化学组成 微生物细胞和其它生物细胞一样,都是 由：碳 、氢、氧、氮、磷、硫、钾、钠、钙 等多种元素组成，其中碳 、氢、氧、氮四种 元素占细胞干重的90～97% 。微生物细胞中 这些元素主要以水、有机物和无机盐的形式 存在于细胞中。 微生物细胞中的有机物 它们主要是：蛋白质、核酸、碳水化合物、类脂、维生素及它们的降解产物等。另外有些微生物还产生色素、抗生素、激素、细菌素和毒素等次生代谢产物。 微生物细胞中的无机盐类 它们主要是：硫酸盐、磷酸盐、盐酸盐及含有钾、钠、钙、镁、铁等无机元素的无机盐类。 5.1.2 微生物的营养物质及功能 通过对微生物化学组成的分析，知道其组成90%以上是C、H、O、N，可以看出微生物生长所需的营养物质主要是大量的水分和构成细胞物质的碳、氮源，其次是一定量的无机盐类。一般来说，微生物利用这些物质就可以生长繁殖，但对某些有特殊营养需求的微生物,还需要少量的生长素(又叫生长因子)。下面简述以上五大类营养物质及功能. （1）水分 水进入细胞后，一部分成为细胞的组分，另一部分处于自由状态，它除直接参加代谢反应外，又是许多代谢反应的介质，也是细胞内营养物质和代谢产物的溶剂。 培养微生物时，一般采用自来水、井水、河水即可，如果有特殊要求可用蒸馏水。 （2）碳源物质 微生物细胞物质组成和代谢产物组成中都有碳素，化能异养型微生物的能量也来自有机碳化物的氧化产能。所以培养微生物时必须供给它可吸收的碳源物质。 不同微生物可利用的碳源不同，有的利用无机碳如：CO2或可溶性碳酸盐，有的利用有机碳如：单糖、双糖及多糖。有机碳化物中，单糖、双糖是最容易被微生物利用的碳源物质。有些微生物还可利用烃类、石蜡、酚类、氰化物作碳源物质，这对环境治理很重要。 （3）氮源物质 氮素是构成微生物细胞物质和代谢产物不可缺少的元素 ，少数化能自养型微生物如硝化细菌，还能利用铵盐、亚硝酸盐等还原态无机氮化物作能源。 不同微生物可利用的氮源物质也不同，有的利用分子态氮，有的利用无机氮化物，有的利用有机氮化物。大多数微生物都可以利用无机氮化物如铵盐、硝酸盐作氮源，硝酸盐常称为生理碱性盐，铵盐常称为生理酸性盐，NH4NO3常称为生理中性盐。实验室常用的氮源有硝酸铵、硫酸铵、尿素、碳酸铵、牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、黄豆粉、玉米浆等。 （4）无机盐 微生物生长需要多种矿质元素，如磷、硫、镁、钾、钙、钠、铁、硼、锰、铜、锌、钼等。这些元素作用是：参与细胞物质和代谢产物的组成，作为酶的组成和酶的激活剂，维持细胞结构的稳定性，调节和维持细胞内渗透压、PH值及氧化还原电位的平衡，参与细胞内的能量代谢。 有些矿质元素，微生物需要的量较大如：磷、硫、镁、钾、钙、钠、铁等，叫大量元素或主要元素；其它一些矿质元素，微生物需要的量较少如：硼、锰、铜、锌、钼、钴等，叫微量元素。矿质元素一般以无机盐的形式供给微生物如：硫酸钾、氯化钠等，微量元素往往在培养微生物时无须单独添加。 （5）生长素 又称生长因子。主要是维生素、氨基酸和核苷等。一些微生物可以自己合成它们的全部生长素，而另一些微生物只能部分合成或不能合成它们所需的生长素，在培养这些微生物时必须供给它们生长素才能使它们生长。添加生长素的方式是在培养基中加酵母膏、豆芽汁、玉米浆、肝脏浸出液或组织提取液等。 另外，有些微生物还需要一些特殊的成分作为生长素，如某些酵母菌和霉菌需要肌醇，某些肺炎球菌需要胆碱，枝原体和酵母菌在厌氧条件下生长时需要甾醇等。 营养缺陷型微生物 当某些微生物由于缺少合成一种或多种生长素的酶而丧失了合成这种或这几种生长素的能力，就必须直接从营养基质中摄取这种或这几种生长素，才能正常生长发育。凡是缺少合成某种生长素能力的微生物，称为这种生长素的营养缺陷型微生物。如组氨酸缺陷型沙门氏菌。 用途：遗传标记、营养分析、突变分析等。 野生型微生物 通常我们把不需要生长素而能在基础培养基上生长的微生物，称为野生型微生物。 5.2 微生物对营养物质的吸收机制 A 吞噬作用：可再细分为吞噬和胞饮。采用这种方式的主要是原生动物和粘菌等。 B 渗透吸收：包括被动扩散、促进扩散、主动运输和基团转位。 浓度梯度 载体 能量 被动扩散 顺 不用 不耗 促进扩散 顺 用 不耗 主动运输 逆 用 耗 基团转位 逆 用 耗 基团转位：这是在主动运输养料的同时，实现养料磷酸