分子生物学研究.ppt

1 目 录 第一节 DNA操作技术 第二节 RNA基本操作技术 第三节 SNP的理论与应用 第四节 核苷酸序列分析 第五节 蛋白质组学技术 第六节 基因芯片及数据分析 基本原理 生理条件下，核酸分子中糖-磷酸骨架中的磷酸基团呈离子化状态，带负电荷，向正极迁移。 由于糖-磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此以同样的速度向正极方向迁移。（电荷效应） 在一定的电场强度下，DNA分子电泳迁移率，取决于核酸分子本身的大小和构型。（分子筛效应） 2、细菌转化与目标DNA分子的增殖 细菌转化（transformation）： 供体菌株 受体菌株 感受态细胞。 常用的转化方法： CaCl2 法 电击法 细菌转化：是指一种细菌菌株由于捕获了来自供体菌株的DNA而导致性状特征发生遗传改变的过程。 供体菌株：提供转化DNA的菌株。 受体菌株：接受转化DNA的细菌菌株。 3、聚合酶链式反应Polymerase Chain Reaction (PCR) Kary Mullis （Cetus Company, USA）于1985年发明了该项技术 1993年获诺贝尔化学奖。 Background PCR又称为无细胞分子克隆法或特异性DNA序列体外引物定向酶促扩增法，是基因扩增技术的重大革新，可将极微量的靶DNA特异地扩增上百万倍。 1971，Kleppe 等人提出P