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- 2019-09-21 发布于浙江
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学案41 基因工程(一) 1.基因工程是在 水平上进行设计和施工的,因此又叫做 ,其原理是 。 2.限制性核酸内切酶主要来源于 ;特点是 ;切割后形成 末端和 末端。 3.DNA连接酶的种类有 和 。 4.载体的作用是 ;必须具备的条件有能在宿主细胞内复制并稳定地保存,具有多个 切点;具有某些 ;种类有 、 和 等。 5.目的基因的获取方法主要有 、 、 。 人工合成 DNA分子 DNA重组技术 基因重组 原核生物 专一性识别双链DNA分子上的某种特定核苷酸序列 黏性 平 T4DNA连接酶 E·coli DNA连接酶 将外源基因送入受体细胞 限制酶 标记基因 质粒 λ噬菌体的衍生物 动植物病毒 从基因文库中获取 PCR技术扩增 6.完整的基因表达载体包括 、 、 、 。 7.转化是指目的基因进入 内,并且在受体细胞内维持 和 的过程。 8.将目的基因导入植物细胞常用的方法有 、 和 ;将目的基因导入动物细胞常用的方法是 ;将目的基因导入微生物细胞常用 处理细胞。 9.检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因的方法是 ;检测目的基因是否转录出mRNA的方法是 ;检测目的基因是否翻译成蛋白质的方法是 。在个体水平上检测目的基因是否表达的方法是 。 抗虫或抗病的接种实验 目的基因 启动子 终止子 标记基因 受体细胞 稳定 表达 农杆菌转化法 基因枪法 花粉管通道法 显微注射技术 Ca2+ DNA分子杂交技术 分子杂交技术 抗原—抗体杂交技术 考点1 基因工程的工具 *考点精讲* 作用底物 作用部位 作用结果 限制酶 DNA分子 磷酸二酯键 黏性末端或 平末端 DNA连接酶 DNA分子片段 磷酸二酯键 重组DNA分子 DNA聚合酶 脱氧核苷酸 磷酸二酯键 子代DNA 项目 种类 1.与DNA相关的酶 (1)五种DNA相关酶的比较 作用底物 作用部位 作用结果 解旋酶 DNA分子 碱基对间的氢键 脱氧核苷酸单链 DNA酶 DNA分子 磷酸二酯键 游离的脱氧核苷酸 项目 种类 (2)限制酶与DNA连接酶的关系(如图) 2.载体 (1)作用 ①作为运载工具,将目的基因转移到宿主细胞内。 ②利用它在宿主细胞内对目的基因进行大量复制。 (2)具备的条件 ①能在宿主细胞内稳定保存并大量复制。 ②有多个限制酶切割位点,以便与外源基因连接。 ③具有特殊的标记基因,以便进行筛选。 (3)种类 ①常用载体——质粒 质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外,并具有自我复制能力的很小的双链环状DNA分子。 ②其他载体 在基因工程中使用的载体除质粒外,还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等。 说明:①一般来说,天然载体往往不能满足人类的所有要求,因此人们根据不同的目的和需要,对某些天然的载体进行人工改造。 ②限制酶切割位点所处的位置必须是在所需的标记基因之外,这样才能保证标记基因的完整性,有利于对目的基因进行检测。 *典例剖析* 【例1】下列与基因工程的基本工具相关的叙述,正确的是 ( ) A.DNA聚合酶、RNA聚合酶、逆转录酶、DNA连接酶都可以 催化形成磷酸二酯键,而限制性核酸内切酶可以催化磷 酸二酯键的断裂 B.不同的限制酶切割DNA产生的黏性末端肯定不同 C.E·coli DNA连接酶既可以“缝合”黏性末端,也可以 “缝合”平末端 D.质粒作为载体的条件之一是必须含有抗药性基因 解析:不同的限制酶切割DNA产生的黏性末端可能相同,故B错误;E·coli DNA连
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