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生物芯片技术;了解生物芯片的功能,及其医学研究领域中的作用,以及生物芯片技术的最新进展。
熟悉生物芯片的种类及其作用,基因芯片、蛋白芯片和微缩芯片实验室的原理及其制备方法。
掌握基因芯片的工作原理、制备方法及其在临床诊断中的意义。;第一节 生物芯片概述;一、生物芯片的定义; 生物芯片技术是通过缩微技术,根据分子间特异性地相互作用的原理,将生命科学领域中不连续的分析过程集成于硅芯片或玻璃芯片表面的微型生物化学分析系统,以实现对细胞、蛋白质、基因及其它生物组分的准确、快速、大信息量的检测。按照芯片上固化的生物材料的不同,可以将生物芯片划分为基因芯片、蛋白质芯片、细胞芯片和组织芯片。 ;二、生物芯片的特点;生物芯片的分类;三、生物芯片在医学中的应用;基因芯片; 基因芯片(gene chip)又称DNA芯片(DNA chip)或DNA微阵列(DNA micro-array)。基因是载有生物体遗传信息的基本单位,存在于细胞的染色体上。将大量的基因片段有序地、高密度地排列在玻璃片或纤维膜等载体上,称之为基因芯片。;基因芯片发展历史;一、基因芯片的原理;基因芯片研制的总体蓝图 ;图11-1 基因芯片技术主要步骤;二、基因芯片技术;2.探针在载体表面的固定
固相载体
固体片状:主要有玻片、硅片和瓷片等;
薄膜状:有硝酸纤维素膜、尼龙膜以及聚丙烯膜等。;探针在载体表面的固定可分为两大类方法:
合成后点样,多用于大片段DNA,有时也用于寡核苷酸,甚至mRNA。
原位合成(即在支持物表面原位合成寡核苷酸探针),适用于寡核苷酸。;(二)样品制备 ;(三)杂交反应;(四)信号检测和分析; 基因芯片杂交结果要用专用的扫描系统读取。;基因芯片扫描结果;GENERAL SCANNING - ScanArray System
;三、基因芯片的应用;表达谱芯片实例;(五)在疾病诊断的应用
(1)感染性疾病的诊断
性传播疾病、肝炎等。
(2)遗传性疾病的诊断
地中海贫血、婚前检查等。
(3)耐药性检测
结核分支杆菌耐药性检测芯片等。;生物芯片的优、缺点;生物芯片于一般分子杂交比较;存在问题;基因芯片技术本身有一些关键问题亟待解决:
(1)基因芯片的特异性的提高
(2)样品制备和标记操作的简化
(3)增加信号检测的灵敏度
(4)高度集成化样品制备、基因扩增、核酸标记
及检测仪器的研制和开发。;THE END
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