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细菌检验自动化技术的应用;学习目的与要求 ; 细菌鉴定的技术近十几年得到了快速发展,从人工鉴定到自动化技术,细菌鉴定技术的发展经历了以下发展历程:;一、微生物数码鉴定法
早在七十年代中期,一些国外公司就研究出借助生物信息编码鉴定细菌的新方法。这些技术的应用,为医学微生物检验工作提供了一个简便、科学的细菌鉴定程序,大大提高了细菌鉴定的准确性。
目前,微生物编码鉴定技术已经得到普遍应用,并早已商品化和形成独特的不同细菌鉴定系统。如API、Micro-ID、RapID、Enterotube和Minitek等系统。这种鉴定系统是自动化鉴定系统的基础。; 数码鉴定 是指通过数学的编码技术将细菌的生化反应模式转换成数学模式,给每种细菌的反应模式赋予一组数码, 建立数据库或编成检索本。 通过对未知菌进行有关生化试验并将生化反应结果转换成数字(编码),查阅检索本或数据库,得到细菌名称。
其基本原理是计算并比较数据库内每个细菌条目对系统中每个生化反应出现的频率总和。;微量生化反应系统;; 先将细菌分离纯化。
做一个革兰染色。
根据染色结果选择不同的生化反应板进行接种(同一个鉴定系统,配有不同细菌的生化反应板)。
培养后,读取生化反应结果,得到一组数据。
将这组数据查编码本(即数据库),即得到鉴定结果。; 国内的:
有河南开封医学生物研究所的肠杆菌科细菌鉴定卡E-15;
上海市卫生防疫站的发酵性革兰氏阴性杆菌鉴定系统SWF-A; ; 二、自动化的微生物鉴定和
药敏试验分析系统; 鉴定系统的工作原理因不同的仪器和系统而异。不同的细菌对底物的反应不同是生化反应鉴定细菌的基础,而试验结果的准确度取决于鉴定系统配套培养基的制备方法、培养物浓度、孵育条件和结果判定等。
大多鉴定系统采用细菌分解底物后反应液中pH的变化,色原性或荧光原性底物的酶解,测定挥发或不挥发酸,或识别是否生长等方法来分析鉴定细菌。 ;1.VITEK-ATB半自动细菌鉴定和药敏分析系统 VITEK-ATB是生物-梅里埃公司产品。
由计算机和读数器两部分组成,计算机程序包括ATB和API的鉴定数据库、ATB的药敏数据库、数据储存和分析系统及药敏专家系统。
鉴定和药敏反应板在机外孵育后,一次性上机读取结果,由计算机进行分析和处理,并报告细菌鉴定和药敏结果。
;2.AutoScan-4半自动细菌鉴定和药敏分析系统
AutoScan-4是由Dade MicroScan公司(美国)生产。
由计算机和读数器两部分组成。鉴定和药敏反应板在机外孵育后,一次性上机,自动判读鉴定和药敏试验结果;亦可人工进行判读,将编码输入计算机,由计算机软件评定结果。有鉴定及鉴定药敏复合板两种测试卡。;(二) 全自动的微生物鉴定和
药敏试验分析系统; 1.VITEK 系统
VITEK AMS是由生物-梅里埃公司生产。第一代产品有以下四个规格VITEK AMS 32、60、120、240。
系统结构 由计算机主机、
孵育箱/读取器、
充填机/封口机、
打印机等组成。
; 鉴定原理 是采用光电比色法,根据不同微生物的理化性质不同,测定微生物分解底物导致pH改变而产生的不同颜色,来判断反应的结果。
每张卡上有30项生化反应。由计算机控制的读数器,每隔1h对各反应孔底物进行光扫描,并??数一次,动态观察反应变化。一旦鉴定卡内的终点指示孔到临界值,则指示此卡已完成。系统最后一次读数后,将所得的生物数码与菌种数据库标准菌的生物模型相比较,得到相似系统鉴定值,并自动打印出实验报告。;使用方法 获得细菌的纯培养后,调整菌悬液浓度
根据不同的细菌选择相应的药敏试验卡片,在充液仓中对卡片进行充液。
置孵育箱/读数器中孵育,自动定时测试、读取数据和判断结果。
鉴定范围
VITEK可快速鉴定包括各种肠杆菌科细菌、非发酵细菌、苛氧菌、革兰阳性球菌、革兰阴性球菌、厌氧菌和酵母菌等500种临床病原菌。
具有20多种药敏测试卡、97种抗生素和测定超广谱β-内酰胺酶测试卡,快速检测细菌药敏情况。 ; VITEK-2是生物-梅里埃公司开发的新一代微生物分析仪,其工作原理与VITEK AMS没有大的差别,但它
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