3植物组织培养技术[1].pptVIP

课题目标 说明植物组织培养的基本原理，学习植物组织培养的基本技术，进行菊花或其他植物的组织培养。 课题重点与难点 课题重点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。 课题难点：植物组织培养过程中使用的无菌技术。 练习 1.答：植物组织培养所利用的植物材料体积小、抗性差，对培养条件的要求较高。用于植物组织培养的培养基同样适合于某些微生物的生长，如一些细菌、真菌等的生长。而培养物一旦受到微生物的污染，就会导致实验前功尽弃，因此要进行严格的无菌操作。 2.答：外植体的生理状态是成功进行组织培养的重要条件之一。生长旺盛的嫩枝生理状况好，容易诱导脱分化和再分化。 1、外植体带菌 2、培养基及接种器具灭菌不彻底 3、接种操作时带入 4、环境不清洁 植物组培污染途径 污染的预防措施 （一）防止外植体带菌 （二）保证培养基及接种器具彻底灭菌 （三）操作人员严格遵守无菌操作规程 （四）保证接种与培养环境清洁 1、培养基的灭菌（高压蒸汽灭菌） 2、外植体的消毒（酒精、氯化汞） 3、接种的无菌操作（酒精、酒精灯——灼烧） 4、无菌箱中的培养； 5、移栽到消过毒的环境中生存一段时间。 思考：在整个操作过程中，是如何来实现无菌环 境的？ 组织培养 原理 过程 意义 利用植物细胞的全能性 快速繁殖，培育无毒植株，培育作物新品种 根芽 植物体 离体植物器官、组织或细胞 (脱分化) 愈伤组织 (再分化) 植物组织培养小结: 操作条件 含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的PH、适时光照等 * 专题3 植物组织培养技术 1、原理: 2、必要条件： 植物细胞的全能性 细胞离体 一定的营养物质、激素和其他外界条件 外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官 植物组织培养技术 3、细胞的全能性 ①定义： 生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性 ②原理： 生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因 已分化的植物细胞，仍具有全能性 ③实例 受精卵生殖细胞体细胞 ④全能性的比较: 1）、培育无病毒植株 2）、 培养紫草愈伤组织,提取紫草素（治疗烫伤和割伤的药物以及染料和化妆品的原料） 4)、基因工程中亦需到植物组织培养的方法 4、植物组织培养的应用： 3）、诱导离体的植物组织形成具有生根发芽能力的胚状结构，包裹上人造种皮，制成人工种子，可以解决有些作物品种繁殖能力差，结子困难或发芽率低等问题 课题1： 菊花的组织培养 一、基础知识 1、植物的组织培养 （1）细胞的分化 ①概念： 在个体发育中，相同细胞的后代在形态、结构、生理功能上发生稳定性差异的过程 ②过程： 如：受精卵增殖、生长、分化形成组织、器官、系统 ③特点： （2）稳定性：细胞分化是稳定的，一般是不可逆转的 （3）全能性：已分化的细胞，仍具有发育的潜能 （1）持久性：是一种持久性的变化，它发生在生物体的整个生命过程中,在胚胎期达到最大限度 ⑤原因： 基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达的结果 ④结果： 形成不同的细胞和组织 2、植物组织培养过程: 离体组织或细胞 植物体 脱分化 细胞分裂素≈生长素 愈伤组织 芽 根 细胞分裂素生长素 细胞分裂素生长素 再分化 植物细胞培养 脱分化：指已经分化的植物器官、组织或细胞,当受到创伤或进行离体(也受到创伤)培养时,已停止分裂的细胞,又重新恢复分裂,细胞改变原有的分化状态,失去原有结构和功能,成为具有未分化特性的细胞。 再分化：已经脱分化的细胞在一定条件下,又可经过愈伤组织或胚状体,再分化出根和芽,形成完整植株,这一过程叫作再分化。 愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞 菠萝的愈伤组织 愈伤组织 2、影响植物组织培养的因素 （1）植物材料的选择 烟草和胡萝卜的组织培养较为容易 枸杞愈伤组织的芽诱导比较难 同一植物材料的年龄、保存时间的长短会影响实验结果 菊花的组织培养一般选择未开花植株的茎上部新萌生的侧枝 一般来说，容易进行无性繁殖的植物，也容易进行组织培养，如芦荟、豆瓣绿、秋海棠、月季 （2）不同的离体组织和细胞对营养、环境等条件的要求相对特殊，需配置不同的培养基 MS培养基主要成分包括： A、大量元素: N、P、K、Ca、Mg、S等 B、微量元素:B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co等 C、有机物:如氨基酸、烟酸、肌醇、维生素，蔗糖等 D、植物激素 ①常用的植物激素：生长素、细胞分裂素和 赤霉素 （3）植物激素的影响 分化频率高 同时使用 细胞即分裂也分化 先使用细胞分裂素后使用生长素 有利于细胞分裂，但不利分化 先使用生长素，后使用细胞分裂素 实验结果 使用顺序 ②生长素和细胞分裂素作用 生长素 细胞分裂素