白杂1号种子纯度的RAPD鉴定技术研究.pdfVIP

白杂1号种子纯度的RAPD鉴定技术研究.pdf

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每 北雇趾 学报 2007,16(1):131~135 ActaAgriculturaeBoreali—occidentalisSinica 白杂 1号种子纯度的RAPD鉴定技术研究 刘 静 ,董振生队,李红兵。 (L 西北农林科技大学动物科技学院,陕西杨凌 712100;2.西北农林科技大学农学院。陕西杨凌 712100) 摘 要:以白菜型油菜新品种 “白杂 1号”父母本及F 代种子为研究材料,用238个 10一mer随机引物对它们 进行了RAPD分析鉴定,结果显示共有68个随机引物出现多态性扩增,DNA片断大小在 0.17~1.8kb之 间。经多次重复验证,引物S 、 和S 条带稳定,并且杂交种条带为双亲互补型;引物Sm为偏父型,在母 本中扩增出350bp特征带,而其在父本中呈阴性。选取S (GGAAGTCGCC)对两个亲本及 F 建立指纹图 谱,共检测出6条强带,其中380bp是母本特征带,1600bp是父本特征带。人为掺杂构建 “白杂 1号”F 代 测试群体,用 s。对其进行了纯度检测 ,结果与预期结果基本一致。对 RAPD方法在鉴定种子纯度 中的有关 双引物混合扩增和条带判断取舍问题进行了讨论。 关键词:白菜型油菜;RAPD;种子纯度 中圈分类号:$565.4 文献标识码:A 文章编号 2007)01—0131-05 IdentificationofGeneticPurityoftheHybrid “BaizaNo.1’’ withRAPD inBrassicacompestrisL. LIU Jing.DONG Zhen—sheng andLIHong—bing (1.CollegeofAnimalScienceandTechnology,NorthwestA & FUniversity,YanglingShaanxi 712100, China;2.CollegeofAgronomy,NorthwestA FUniversity。YanglingShaanxi 712100,China) Abstract:Bothhybridrapeseed “BaizaNo.1’’anditsparentswereanalyzedbyRAPD markersinthis study,theresultsshowedthat68 primers,whichwereselected from 238 10一marRAPD primers, couldgeneratedpolymorphicproductsrangingfrom 17O~1,800basepairs(bp).Byanalyzingoftheir fingerprints,S24,S83andS104couldproducebothmaternal—specificandpaternal—specificDNA bands andthereproducibintywassteadyafterrepeating thetests,whileS176onlycouldproducespecific bandstothemother.Bycomparison,S1o4wasthebesttobeusedinidentificationofthepurityinF1. Itcouldproduce6brightbands;oneisthefragmentat380bpwhichwasuniquetothemaleline,an— otherwasthefragmentat1600bpwhichwasuniquetothefemalelineandthetWOfragmentswere complementaryintheF1generation.ResultbasedonRAPD markersbyprimerS104showedthat23 rapeseedswerenotrealhybridsin theself_establishedF1populationof“BaizaNo.1”whichwascorn posedof10maternalrapeseeds,10paternalrapeseedsand80hybrids.

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