克隆载体表达载体课件.pptVIP

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2019-09-21 发布于江苏
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克隆载体表达载体课件.ppt

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LOGO 克隆载体表达载体(课件) 定义：可携带插入的外源DNA片段并可转入受体细胞中大量扩增的DNA分子。该分子中含有能够在受体细胞中自主复制的序列和筛选标记，常用于外源基因的克隆，如噬菌体或质粒。通常采用从病毒、质粒或高等生物细胞中获取的DNA作为克隆载体，在载体上插入合适大小的外源DNA片段，并注意不能破坏载体的自我复制性质。将重组后的载体引入到宿主细胞中，并在宿主细胞中大量繁殖。克隆载体克隆载体必须具备什么条件? 具有使外源DNA片段插入的限制性酶识别位点（外源性DNA能组入）能将外源DNA导入到受体细胞并进行自我复制（能繁殖）必须具有选择标记（能筛选出来） A C B 常用的克隆载体质粒载体病毒载体(噬菌体载体) 混合载体（由以上三类中的两种以上相互组合或与其他基因组DNA组合而成）高质量的克隆载体所必须具备的一些特征：拷贝数不能太低，以保证转化效率应该有两个以上用来克隆外源DNA的单一的限制性内切酶识别位点；应该有一个或多个易于检出的选择标记基因 1 2 3 专用载体染色体定位整合载体启动子探针载体诱导型表达载体组织特异性表达载体反义表达载体定义：在克隆载体基本骨架的基础上增加表达元件（如启动子、RBS、终止子等），使目的基因能够表达的载体。包括原核表达载体和真核表达载体，可以是质粒、噬菌体或病毒等。典型的表达载体带有能使基因表达的调控序列，并在适当位置有可插入外源基因的限制性内切酶位点。表达载体