祛痤疮功能评价方法(征求意见稿)及修订说明.docVIP

PAGE 1 附件7： 祛痤疮功能评价方法（征求意见稿） 保健食品评价试验项目、试验原则及结果判定 Items, Principles and Result Assessment 1 试验项目 1.1 动物实验 1.1.1表皮厚度 1.1.2毛囊腔面积 1.2 人体试食试验 1.2.1 痤疮数目 1.2.2 皮损分级 1.2.3 病变积分 2 试验原则 2.1 动物实验和人体试食试验所列指标均为必做项目。 2.2 应对临床症状、体征进行观察。 2.3 在进行人体试食试验时，应对受试样品的食用安全性作进一步的观察。 3 结果判定 3.1 动物实验：受试样品至少两个剂量组与模型对照组比较，表皮厚度与毛囊腔面积均显著减少，可判定该受试样品动物实验结果为阳性。 3.2 人体试食试验：试食组大多数受试者无新发痤疮且原痤疮皮损程度不加重（有效率≥80%），同时痤疮总数明显减少（≥20%并具有统计学差异）或病变总积分明显减少（≥20%并具有统计学差异），可判定该受试样品具有祛痤疮的功能。  祛痤疮功能检验方法 Method for the Assessment of Eliminanting Acne Function 1 动物实验 1.1 实验原理 实验动物经煤焦油涂抹，堵塞毛孔，可引起炎性病变，出现类似人体的痤疮样病损。比较给予实验动物受试样品后，皮损程度（数目、面积、损伤类型）的变化，可判定该受试样品是否具有祛痤疮的作用。 1.2实验动物 推荐使用单一性别健康成年雄性兔（新西兰兔或日本大耳兔），体重2.5kg±0.2kg。每组6-8只。 1.3剂量分组及受试样品给予时间 实验设三个剂量组、一个空白对照组和一个模型对照组，三个剂量组中应包括一个人体推荐量的5倍。受试样品给予时间30天，必要时可延长至45天。 1.4 实验步骤 本实验采用煤焦油致皮损动物模型和造模成功后给予受试物的方法。 空白对照组不做任何处理。实验组在左耳内侧耳管开口处2.0cm×2.0cm范围内，使用50%的煤焦油液（液体石蜡稀释）0.5ml涂抹，每日一次。右耳作为自身对照。给药2周后，如涂抹处出现皮肤干燥和角化过度、粗糙和增厚，粉刺样皮损，毛囊口隆起、扩张及黑色角栓等，说明模型成功。 将造模成功的动物分为受试物3个剂量组和模型对照组，受试物可以选择伴饲或灌胃给予，选择灌胃时，模型对照组使用蒸馏水或去离子水灌胃。末次给予受试物后24h，肉眼观察涂煤焦油处皮损的改变，照相，取病灶中心组织全层（约1.0cm×1.0cm面积），4%甲醛固定，常规石蜡包埋，连续切片25张，每隔5张取一张切片（即每只动物共取5张切片），常规HE染色，显微镜下进行病理组织学检查。 1.5 观察指标 ①毛囊腔面积：每张切片随机观察5个视野，用图像分析技术对其毛囊腔面积进行测量；以平均面积作为该动物的毛囊腔面积。 ②表皮厚度：每张切片随机观察5个视野，用图像分析技术对其表皮厚度进行测量；以平均厚度作为该动物的表皮厚度。 1.6 数据处理和结果判定 一般采用方差分析，但需先进行方差齐性检验，方差齐，则计算F值。若F值 F0.05，结论为各组均数间差异无显著性；若F值≥F0.05（即P≤0.05），结论为各组均数间差异有显著性，需进一步使用多个实验组和一个对照组间均数的两两比较方法进行统计分析。对非正态分布或方差不齐的数据需进行适当的变量转换，待满足正态分布或方差齐的要求后，用转换后的数据进行统计分析；若经变量转换仍不能达到正态分布或方差齐的目的，则改用秩和检验进行统计分析。 结果判定：受试样品至少两个剂量组的表皮厚度和毛囊腔面积均较模型对照组有明显改善（有统计学差异），可判定该受试样品祛痤疮动物实验结果为阳性。 2 人体试食试验 2.1受试者纳入标准 选择临床痤疮I— = 3 \* ROMAN III度的自愿受试患者，男女均可。 临床痤疮按皮损程度分度标准：I度：粉刺为主，有少量丘疹和脓疱，总病灶数少于30；II度：有粉刺，中等数量的丘疹和脓疱，总病灶数为31-50；III度：有大量丘疹和脓疱，偶见大的炎性皮损，总病灶数为51-100，结节少于3个；IV度：结节/囊肿性痤疮或聚合性痤疮，总病灶数超过100个，结节/囊肿多于3个。 2.2受试者排除标准 2.2.1年龄在14 岁以下或65 岁以上者，妊娠或哺乳妇女，及对本保健食品过敏者。 2.2.2合并有心、肺、脑血管、肝、肾和造血系统等严重性疾病及精神病患者。 2.2.3短期内服用与受试功能有关的物品，影响到对结果的判断者。 2.2.4未按规定服用受试样品的受试者，资料不全影响功效或安全性判断者。 2.2.5痤疮临床分级为IV度者。 试验设计及分组要求 采用自身和组间两种对照设计。按受试者的痤疮情况随机分为试食组和对照组，尽可能考虑影响结