第1章 固液分离技术.pptVIP

可溶性杂质 可 溶 性 杂 质 来 源 蛋白质/多肽 细胞中各种结构功能蛋白、酶类等，多数可以通过沉淀、吸附、色谱、超滤及超速离心等方法去除 脂类/脂蛋白质 细胞膜磷脂分子、脂蛋白等具有亲水性，当提取液中存在有机溶剂时，或发酵培养时所添加的油性消泡剂也可溶解于提取液中。用萃取法去除 多酚类 多为植物组织或细胞来源的色素类物质，发酵产物粗制提取液中亦存在，一般用吸附、沉淀或色谱法去除 核酸类 细胞裂解过程释放，使黏度增大，可用离子交换色谱、硫酸鱼精蛋白沉淀或加核酸酶消化等方法除去 内毒素 脂多糖物质，多来自革兰阴性菌的细胞壁，可用超滤、吸附、离子交换色谱和亲和色谱的方法去除 牛血清 细胞培养液中加入的牛血清成分 小分子类物质 糖类以及工艺处理溶液中所含有的小分子组分，可采用透析、色谱和超滤（膜分离）等手段去除 盐类 含Ca2＋、Mg2＋、Fe2＋的盐，加酸或碱去除 预处理的原理及方法 1.降低液体黏度 降低液体黏度可提高过滤速率。怎样降低？ （1）加水稀释法 :可有效降低液体粘度,但增加悬浮液的体积，使后处理任务加大。 （2）升高温度:①让发酵液通过螺旋板、列管等换热器，用热介质进行加热；②如果目标物质受温度变化影响较小，发酵液又需适当稀释时，可在发酵液内直接通入蒸汽或热水进行加热。 3.酶解法 酶解法可将混合液中的不溶性多糖物质酶解，使其转化为溶解度较大的单糖，从而改变流体的流动特性，提高过滤速率 。 2.调整pH值 调pH至等电点使两性物质沉淀。在膜分离中，调整pH，改变易吸附分子的电荷性质，以减少吸附造成的堵塞和污染。 pH值的调节一般是在发酵液中加入一定浓度的酸（碱）溶液，如果需要也可加入一定量的酸（碱）缓冲溶液。 （1）凝聚作用（coagulation） 凝聚作用是指在某些电解质（凝聚剂）作用下，使胶粒之间双电层的排斥作用降低（中和电荷），电位下降，吸引作用加强，破坏胶体系统的分散状态，而使胶体粒子聚集的过程。 胶体粒子保持分散状态的原因： 常用的凝聚剂（无机盐）：AlCl3·6H2O、Al2(SO4)3·18H2O、K2SO4·Al2(SO4)3·24H2O、FeSO4·7H2O、FeCl3·6H2O、ZnSO4和MgCO3等。 影响凝聚作用的主要因素是：无机盐的种类、化合价及无机盐用量等。 4.凝聚与絮凝 （2）絮凝作用（flocculation） 絮凝作用是利用带有多种官能团的高分子线状化合物能在分子上吸附多个微粒的能力，通过架桥作用将许多微粒聚集在一起，形成粗大的松散絮团的过程。所利用的高分子化合物称为絮凝剂。根据絮凝剂所带电性的不同，分阴离子型、阳离子型和非离子型三类。 排斥电位和产生吸附架桥作用的双重机制是絮凝的主要原因。 带有负电性的微粒，加入阳离子型絮凝剂，具有降低离子排斥电位和产生吸附架桥作用的双重机制；而非离子型和阳离子型絮凝剂，主要通过分子间引力和氢键等作用产生吸附架桥。 高分子絮凝剂的吸附架桥作用 影响絮凝作用的主要因素： 　①高分子絮凝剂的性质和结构；②絮凝剂操作温度 　③pH值；④搅拌速率和时间；⑤絮凝剂的加入量 　⑥絮凝剂浓度 絮凝剂种类： 按组成不同又可分为无机絮凝剂、有机絮凝剂和生物絮凝剂 ①无机絮凝剂 如明矾、氯化铁等小分子絮凝剂；聚合铝盐、聚合铁盐等高分子絮凝剂。 ②有机高分子絮凝剂 如人工合成的絮凝剂：二甲基二烯丙基氯化铵与丙烯酰胺的共聚物或均聚物、聚二烯基咪唑啉、聚丙烯酸类衍生物、聚乙烯吡啶类衍生物等 ；天然有机高分子絮凝剂：聚糖类胶粘物、海藻酸钠、明胶、骨胶、壳多糖等 ③生物絮凝剂 蛋白质、粘多糖、纤维素和核酸等。 5．加入助滤剂 可以改变滤饼的结构，降低滤饼的可压缩性，从而降低过滤阻力。 助滤剂的使用方法：①将助滤剂在支持介质（滤布）的表面上预涂助滤剂薄层1～2 mm；②将助滤剂分散在待过滤的悬浮液中。 常用的助滤剂：硅藻土、纤维素、石棉粉、珍珠岩、白土、炭粒、淀粉等。最常用的是硅藻土。 6.加入反应剂 加入某些不影响目的产物的反应剂，可消除发酵液中某些杂质（沉淀）对过滤的影响，从而提高过滤速率。 7．降低温度 降低其温度有利于减少目标产物在后序提取或分离过程中发生分解或水解。 发酵液的相对纯化 1．无机离子的去除 发酵液中主要的无机离子有Ca2+ 、Mg2+ 、Fe2+等。 Ca2+ +草酸or草酸钠