硼酸盐对马铃薯干腐病菌的抑菌特性研究.docVIP

周矿归：硼酸盐对马铃薯干腐病菌的抑制特性研究 PAGE 5 硼酸盐对马铃薯干腐病菌的抑菌特性研究 周矿归 （甘肃农业大学食品科学与工程学院 兰州 730070） 摘要：本文通过体内和体外试验，研究了不同浓度硼酸钠和四硼酸钾对马铃薯采后干腐病菌的抑菌特性。在体内试验中，两种硼酸盐均能有效地控制损伤接种硫色镰刀菌(Fusarium sulphureum)的马铃薯块茎干腐病的扩展，其中以1.0%硼酸钠的控制效果最好；而在体外试验中，F. sulphureum 菌丝生长和孢子萌发能被两种硼酸盐抑制，其抑制作用随着浓度的增加而增加，1.0%四硼酸钾最好，其菌落直径仅为对照的5.8%。可见硼酸盐可通过抑制病原物的生长而有效地控制马铃薯干腐病。 关键词：马铃薯；硫色镰刀菌；硼酸钠；四硼酸钾；抑菌特性 前言 马铃薯是我国北方的重要经济作物，甘肃省作为我国马铃薯生产的最佳适宜区之一，目前全省马铃薯种植面积扩大到746万亩，居内蒙古自治区之后，列全国第二；总产量达到755万吨，居全国第一[1]。马铃薯的种植、发展越来越引起人们的重视。但是近年来，马铃薯贮藏期腐烂问题也日渐突出。据调查造成烂窖的主要原因是块茎携带病菌。虽然马铃薯块茎病害有15多种，但是其中Fusarium solani和晚疫病复合侵染或Fusarium solani诱发侵染是导致烂窖的主体，有调查显示，马铃薯贮藏期间，平均病薯率为27.59%，其中88.5%为黑色干腐病型病薯[2]。最终导致马铃薯减产和商品性降低，对生产者造成极大的损失。 干腐病又名“干腐烂”，染病块茎长白色至灰色绒毛物，内部薯肉则呈灰褐色至深褐色病变，有的出现空心，空腔内充满菌丝体，严重时整个块茎僵缩或呈干腐状，不能食用[4]。目前采后防治主要有物理方法，如收获或贮藏期尽量避免一切机械损伤，精选种薯，剔除病薯、虫薯、伤薯，贮藏期间勤检查，发现病薯应及时剔除，减少传播，但物理方法操作较为复杂且费用较高，不易推广。干腐病是由镰刀菌（Fusarium spp.）[3]所致病的。干腐病是限制马铃薯产业化发展的主要采后病害之一，目前主要利用如施宝特、世高﹑敌力脱﹑适乐AF-137﹑奥美灵3号[5]等化学杀菌剂进行控制，然而化学杀菌剂的大量使用不仅会产生环境污染、农药残留等问题，也导致了抗药菌株的产生，使其使用受到越来越多的限制，因而，必须寻求新的安全高效的防腐剂，以逐步取代和减少化学杀菌剂使用[6]。 硼酸盐有偏硼酸盐、原硼酸盐、和多硼酸盐等。最重要的硼酸盐是四硼酸钠，俗称硼砂。硼砂的分子式为Na2B4O5(OH)·8H2O习惯上也常写作（Na2B4O7·10H2O）。四硼酸根阳离子的立体结构如下：在四硼酸根中有两个BO3平面三角形和两个BO4四面体通过共用角顶O原子而联结起来[7]。世界硼酸盐产品主要用于玻璃纤维、搪瓷、陶瓷、洗涤、漂白、绝缘材料、阻燃剂、医药、农业等领域。硼酸盐产品的大宗用途近几年内不会有大的改变, 但一些新用途, 目前用量虽小, 市场潜力很大, 如硼酸盐在生物抑制菌种方面应用， 虽然用量不大，但如果能成功的话，却有较好的市场前景[8]。 但有关硼酸盐在采后病害控制中的应用研究尚未见报道。因此本研究通过体内和体外试验，研究硼酸钠和四硼酸钾对马铃薯干腐病菌的控制效果极其对病原物的抑制作用，以期为马铃薯干腐病的防治提供新的方法。 1 材料与方法 1.1 材料 供试材料：青薯168，来自青海省农业科学院 。 供试菌种：硫色镰刀菌（Fusarium sulphureum Schlechlendahl），甘肃省农业科学院植物保护所提供。 硼酸钠（Na2BO3）天津化学试剂厂，分析纯。 四硼酸钾（K2BO3．4H2O）天津化学试剂厂，分析纯。 1.2 方法进一步细化 进一步细化 1.2.1培养基制作 参照方中达 [9]法进行。制作马铃薯水琼脂培养基(PDA)，培养基成分：马铃薯200g，蔗糖20g，琼脂17～20g，蒸馏水1000mL。将马铃薯切碎，加水煮沸30min后过滤。同时将糖和琼脂分别溶解后与马铃薯过滤液混合，并定容至1000mL。分装在三角瓶中进行高压灭菌。灭菌后制备平板PDA。 1.2.2病原菌的分离、纯化和鉴定 参照方中达[9]法。采集典型马铃薯干腐病块茎，用75%酒精表面消毒，无菌水冲洗后，切取病健交界处组织，在无菌操作条件下移置到PDA平板上，于28℃保温培养，待长出分生孢子后进行单孢分离，纯化后在PDA培养基上保存待用。 1.2.3 参照Bi et al.[10]方法。取25℃培养7d的硫色镰刀菌菌株培养皿一个，加含0.05% Tween80的无菌水约10ml收集病原菌孢子，用四层纱布过滤并转入已灭菌的三角瓶中，振荡器上充分振荡，待孢子完全被打散均匀后，获得纯孢子悬浮液，经显微血球