高中生物同步精品课堂 专题2.2 动物细胞工程名师优质课件 新人教版选修3.pptVIP

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2.2.2动物细胞融合与单克隆抗体 动物 细胞 融合 细胞A 细胞B 杂种细胞 灭活的病毒 物理法 化学法 用灭活的病毒诱导动物细胞融合过程 细胞核 病毒颗粒 细胞核 细胞融合与融合诱导细胞融合物质 诱导剂:病毒、聚乙二醇 诱导细胞融合的病毒必须灭活。 思考讨论:为什么细胞融合过程中使用的病毒需要灭活? 二、单克隆抗体 什么是抗体?   抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 B淋巴细胞产生抗体。 单克隆抗体  由单个B淋巴细胞经过无性繁殖(克隆),形成基因型相同的细胞群,这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体称为单克隆抗体。   特点:特异性强、灵敏度高 单克隆抗体制备过程 注射抗原 B淋巴细胞 骨髓瘤细胞 细胞融合、筛选 杂交瘤细胞 细胞培养 筛选,继续培养 足够数量的、能产生特定抗体的细胞群 体外培养 注射到小鼠腹腔 单克隆抗体 单克隆抗体的应用 与常规抗体相比,单克隆抗体产量高,特异性强,灵敏度高。 应用主要有: 1、临床诊断 2、作为载体,运载抗癌药物,形成“生物导弹”治疗肿瘤 植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较 比较项目 植物体细胞杂交 动物细胞融合 细胞融合原理 细胞膜的流动性、 细胞膜的流动性 细胞融合的方法 去除细胞壁后诱导原生质体融合 使细胞分散后诱导细胞融合 诱导方法 物理(离心、振荡、电刺激) 化学(聚乙二醇) 物理、化学方法(同左) 灭活的病毒 用途 获得杂种植株 制备单克隆抗体 【即时巩固】 回答下列有关动物细胞培养的问题: (1)在动物细胞培养过程中,当贴壁细胞分裂生长到细胞表面________时,细胞会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的________。此时,瓶壁上形成的细胞层数是_______________。 要使贴壁的细胞从瓶壁上分离下来,需要用酶处理,可用的酶是________。 相互接触 接触抑制 单层(或一层) 胰蛋白酶 ((2)随着细胞传代次数的增多,绝大部分细胞分裂停止,进而出现__________的现象;但极少数细胞可以连续增殖,其中有些细胞会因遗传物质发生改变而变成________细胞,该种细胞的黏着性________,细胞膜表面蛋白质(糖蛋白)的量_____。 衰老甚至死亡 不死性 降低 减少 (3)现用某种大分子染料,对细胞进行染色时,观察到死细胞被染色,而活细胞不染色,原因是___________________________________________________________________。 (4)检查某种毒物是否能改变细胞染色体的数目,最好选用细胞分裂到________期的细胞用显微镜进行观察。 由于活细胞的膜具有选择透过性,大分子染料不能进入活细胞内,故活细胞不能着色 中 (5)在细胞培养过程中,通常在________条件下保存细胞。因为在这种条件下,细胞中________的活性降低,细胞________的速率降低。 (6)给患者移植经细胞培养形成的皮肤组织后,发生了排斥现象,这是因为机体把移植的皮肤组织当作______进行攻击。 冷冻 酶 新陈代谢 抗原 选修三专题二细胞工程 第二节 动物细胞工程 动物细胞培养 动物细胞融合 单克隆抗体制备 细胞核移植 动物细胞工程技术 动物细胞工程的基础 2.2.1动物细胞培养和核移植技术 (一)、概念 是指从动物机体内取出相关的组织,将它分散成单个细胞,然后放在适宜的培养基中,让这些细胞生长和增殖。 (二)、原理 细胞分裂增殖 动物细胞培养 (三)、过程 幼龄动物 剪碎组织 原代细胞培养 取动物器官 和组织 细胞悬浮液 传代细胞培养 胰蛋白酶处理 单个细胞 胰蛋白酶处理 单个细胞 细胞贴壁:培养贴附性细胞时,细胞要能贴附于底物上才能生长繁殖. 细胞接触抑制 细胞在贴壁生长过程中,随着细胞分裂,数量不断增加,最后形成一个单层,此时细胞间相互接触,细胞分裂和生长停止,数量不再增加。 有关概念 原代培养:从机体取出后立即培养的细胞为原代细胞。一般培养的第1代细胞与传10代以内的细胞称为原代细胞培养。 传代培养:将原代细胞从培养瓶中取出,配制成细胞悬浮液,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养,称为传代培养。 归纳过程 取 的组织、器官 细胞悬浮液 酶 贴满瓶壁的细胞 单个细胞 加入 液 动物胚胎或幼龄动物 胰蛋白 培养 接触抑制 原代培养(分装前) 1-10代细胞 遗传物质 改变 原代细胞 培养 加 液 40—50代细胞(细胞株) 未 遗传物质 改变 无限传代(细胞系) 已 传代培养

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