DNA修饰及其检测技术.pptxVIP

第四节：DNA修饰;CpG岛（CpG Island）;DNA甲基化的作用;用组蛋白Hl与含CCGG序列的甲基化和非甲基化DNA实验后发现： 甲基化达到一定程度时会发生从常规的B-DNA向Z-DNA的过渡。又由于Z-DNA结构收缩，螺旋加深，使许多蛋白质因子赖以结合的元件缩入大沟而不利于基因转录的起始。 DNA甲基化导致某些区域DNA构象变化，影响蛋白质与DNA的相互作用；抑制转录因子与启动区DNA的结合效率。 用序列相同但甲基化水平不同的DNA为材料，比较其作为RNA聚合酶转录模板的活性，发现甲基的引入不利于模板与RNA聚合酶的结合，降低了其体外转录活性。 5-甲基胞嘧啶在DNA上并不是随机分布的，基因的5端和3’端往往富含甲基化位点，而启动区DNA分子上的甲基化密度与基因转录受抑制的程度密切相关. ;组织培养的细胞由于甲基化作用，使细胞系不能表达出相应的组织特异性蛋白质。 2006年制备了拟南芥的全基因组甲基化图谱，发现转录区域1/3以上的表达区域出现了甲基化；而启动子区有少于5％的基因出现了甲基化；在转录区域的甲基化表现出了明显的组织特异性。 甲基化通常发生于外源序列中，使其处于异染色质状态，是寄主抵御外源序列入侵的策略，是1种主动防御机制。 ;DNA甲基化形成过程;CpG甲基化形成机制： 甲基化酶： Dam甲基化酶：催化GATC中的A甲基化（原核） Dcm甲基化酶：催化CC