22基因工程载体-噬菌体载体09.pptVIP

第二节 噬菌体载体 2012.09 一、?噬菌体载体 λ噬菌体感染细菌后的溶菌性生长和溶源性生长 溶菌性生长（lytic pathway） 噬菌体感染细菌后，借助其2个COS位点互补成环，在宿主菌体内连续复制，合成大量基因产物，进而装配成噬菌体颗粒，裂解宿主菌，释放出来的噬菌体又可感染其他细菌。 溶源性生长(lysogenic pathway) 噬菌体感染细菌后，可将自身DNA整合到细菌的染色体中去，与之一起复制，并遗传给子代细胞，宿主细胞不被裂解 。 ?噬菌体 ◆ λ噬菌体载体可接受15 kb-23 kb的外源DNA片段，它既可作为克隆载体，也可作为表达载体，广泛用于各类基因库的构建。 二、单链噬菌体载体 3. M13噬菌体 （一）粘粒(cosmid) 3 PCR产物克隆载体 T 载体 pCR系列载体 Invitrogen公司开发的线性噬菌粒载体。 ① 结构 pUC的质粒部分、fi噬菌体ori、Kanr和Ampr抗性。 MCS的中部已经切开，各有一个3’端突出的T。 ② 特点 PCR产物往往在3’端突出一个A，所以能与这个载体直接连接。 T vector的克隆过程——简便！ A A T T T vector PCR product T4 DNA ligase A A 四、柯斯质