土壤速效磷的测定.pptVIP

1. 活性炭一定要洗至无磷无氯反应，否则不能使用。 2.加入显色剂后会产生气泡，易使液体溢出，造成测定误差。须小心慢慢加入，同时充分摇动，等气体排出后再定容。否则气体影响比色结果。 3. 显色温度对结果影响较大，要求的20－25℃条件下进行。 注意事项： 1.为什么在报告土壤速效磷的测定结果时必须同时说明所采用的测定方法？ 2. 用本方法测定 土壤速效磷在操作过程中要注意什么？ 3. 利用测定结果判定土壤磷素丰缺水平。 思考题 磷系列标准液ρ/（mg/L） 0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 吸光度A 0.000 0.050 0.112 0.163 0.234 0.295 植物生产环境 “ ” “ ” 讲课人：史培华 系别：农艺系 植物生产环境 土壤中磷的形态 实验的目的意义 实验的测试原理 仪器、材料与试剂 操作步骤及注意事项 结果计算方法 本节内容： 土壤中磷的形态 土壤中的磷 （P 69-70） 有机态磷：磷脂、植素、核酸、核蛋白 无机态磷 水溶性磷：磷酸钾、磷酸钠 弱酸性磷：磷酸氢钙 难溶性磷 速效磷 （有效磷） 表1 土壤中磷的形态 实验的目的意义 测定土壤速效磷的含量，可为合理分配和施用磷肥提供理论依据。（施肥！） *说明：应用不同的测定方法在同一土壤上可以得到不同的速效磷含量。在测定土壤速效磷时，应特别注意所采用的测定方法。在中性土壤和石灰性土壤，一般采用碳酸氢钠或碳酸铵来提取。 测试原理 采用NaHCO3浸提-钼锑抗比色法测定土壤速效磷。 石灰性土壤中的速效磷，多以磷酸一钙和磷酸二钙的状态存在，可用0.5mol/L的NaHCO3提取到溶液中；用浸提出来的溶液（含磷）用钼锑抗混合显色剂在常温下进行还原成为磷钼蓝，蓝色深浅在一定浓度范围内与磷的含量成正比，因此，可用比色法测定其含量。 仪器和材料 分光光度计、振荡机、或光电比色计、天平（0.01g）、三角瓶（250ml）、容量瓶（50ml）、漏斗、无磷滤纸、移液管（10ml）。 分光光度计 振荡机 往复式 回旋式 过滤 滤纸的叠法 玻璃棒引流 1. 0.5mol/L的NaHCO3（pH8.5）浸提液 称取化学纯NaHCO3 42.0g溶于800ml蒸馏水中，以4mol/L?NaOH溶液调节pH至8.5（用pH计测定），然后稀释至1000ml，保存在试剂瓶中。如果贮存期超过1个月，是用时应重新调整pH。 2. 无磷活性炭 将会活性炭先用1：1（V/V）的盐酸浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水冲洗多次至无Cl-为止，在用0.5mol/L?NaHCO3溶液浸泡过夜，在布氏漏斗上抽滤，用蒸馏水洗尽NaHCO3，检查至无磷为止，烘干备用。 实验试剂 3. 7.5mol/L硫酸钼锑抗贮存液 在1000ml烧杯中加入400ml蒸馏水，将烧杯浸在冷水中，然后缓慢注入208.3ml浓硫酸（分析纯），并不断搅拌，冷却至室温。另称取分析纯钼酸铵20g溶于60℃的150ml蒸馏水中，冷却。再将硫酸溶液慢慢倒入钼酸铵溶液中，不断搅拌，最后加入1000ml0.5%酒石酸锑钾溶液，用蒸馏水稀释至1000ml，摇匀，贮存于棕色试剂瓶中，避光保存。 4. 钼锑抗混合显色剂 称取1.50g抗坏血酸（左旋，旋光度+12～+22，分析纯）溶于100ml钼锑抗贮存液中，混匀。此试剂有效期为24h，宜用前配制，随配随用。 实验试剂 实验试剂 5. 磷标准液 准确称取在105℃烘箱中烘干2h的分析纯KH2PO40.2195g，溶于400ml蒸馏水中。加浓硫酸5ml，转入1000ml容量瓶中，加蒸馏水定容至刻度，摇匀，此溶液为50mg/L磷标准液，此溶液不易久贮。 1. 称取通过20号筛的风干土样5克（精确到0.01克）置于250毫升三角瓶中，加100ml 0.5mol/L NaHCO3溶液，再加一小角勺无磷活性炭，塞紧瓶塞，在振荡器上震荡30分钟，立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤，滤液承接于250毫升三角瓶中。 2. 吸取滤液10ml（含磷量高时取2.5~5毫升，同时应补加0.5mol/L NaHCO3至10毫升）于50ml容量瓶中，加7.5N硫酸钼锑抗混合显色剂5ml，利用其中多余的硫酸来中和NaHCO3, 充分摇匀，等CO2充分排出后加水定容至刻度，再充分摇匀（最后的硫酸浓度为0.65N）。 3. 30分钟后用72型分光光度计比色（波长660微米），比色时须同时做空白测定。 4. 磷标准曲线绘制：分别吸取5ppm磷标准溶液0、1、2、3、4、5毫升于50毫升容量瓶中，每一容量瓶即为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5ppm磷，再逐个分别加入0.5m