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药物半数有效量的测定 实验人员：吴海韬 傅倩云 袁静 秦铭铭 顾晓婷 王古平 指导老师：杜斌 一、实验目的和原理 学习整体动物质反映的实验方法 学习实验动物常用的分组和编号方法 掌握ED50实验和计算方法 原理 戊巴比妥钠为巴比妥类镇静麻醉药，用适当剂量给小鼠腹腔注射后产生的催眠效应，常用翻正反射的消失来判断。该指标仅有阳性（催眠）和阴性（不催眠）两种现象，属于质反应。 质反应量曲线的横坐标为对数剂量，纵坐标为累加阳性频数，可得标准的S型曲线。在一定的剂量范围内各组的反应率将随着剂量加大而递增。而在该曲线的中央部分（50%反应处）接近一条直线，斜度最大，其剂量测定也最为准确，误差最小。 二、实验材料 实验对象 小鼠 实验仪器 烧杯，注射器，电子天平 实验试剂及药品 不同浓度的戊巴比妥钠 三、实验步骤 本实验分5个组，每个实验组取体重20克左右小白鼠6只，称重，编号，分为5组。 每个实验分别给小白鼠腹腔注射不同剂量（49、39、31、25、20mg/kg）的戊巴比妥钠，每个剂量注射6只小白鼠（给药顺序按剂量从低到高），记录给药时间 以翻正反射消失作为入睡指标，给药15分钟后，记录实验组出现催眠的鼠数，汇集全班结果。 采用公式ED50=log-1［ X m – i×( ∑P - 0.5)］计算结果 四、实验结果统计 组别 剂量（mg/kg） Log D 实验鼠数(只) 催眠鼠数(只) 反应百分率(%) P ED50 1 49 1.6900 6 6 100 1 36.39 2 39 1.5611 6 4 16.7 0.167 3 31 1.4911 6 1 16.7 0.167 4 25 1.3679 6 0 0 0 5 20 1.3010 6 0 0 0 注：ED50=log-1［X m– i×( ∑P - 0.5)］。其中ED50为药物半数有效量； X m=log49=1.6900，为最大剂量对数值； i=log(49/39)=0.09913，为相邻两组剂量比值的对数； P为动物反应率；∑P为各组反应率的总和 五、注意事项 一定以翻正反射消失作为入睡指标，如果小白鼠卧着貌似入睡，但翻转使其腹部向上，松手后不能保持腹部向上体位则不算入睡。 本实验为定量实验，注射药量必须准确。给药后要仔细观察药物反应，但不可过多地翻动小鼠，以免影响实验结果。 室温以20℃为宜 六、思考题 半数有效量(ED50)测定的目的意义如何？ 答：半数有效量 (ED50)在量反应中是指能引起50%最大反应强度的药物剂量；在质反应中只引起50%实验动物出现阳性反应的药物剂量。半数致死量越大，半数有效量越小，则表明药物的安全度越高。因而常用治疗指数(LD50/ED50)作为药物安全度的指标。其比值越大，则安全度越高；其比值越小，则安全度也就越小。 小白鼠如何分组，同学分成几组较为合适？怎样把30只小鼠分给同学们？ 答：先以少量动物做预实验，以获得小鼠对戊巴比妥钠催眠反应率为100%的最小剂量和反应率为0%的最大剂量，然后在此范围内，一般分成4~8个剂量组(本实验取5组)进行实验。对小鼠进行随机分组前，可先称各小鼠体重，将体重相同小鼠放一笼，分别做好标记。再按确定组数查随机数字表分组，使各组平均体重及体重分布尽可能一致。而同学们则被分成了5组，每组6只小鼠。 谢 谢！