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干细胞研究及应用 1.(2013·山东理综,35)科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠,流程如下: (1)从黑鼠体内获得体细胞后,对其进行的初次培养称为____________,培养的细胞在贴壁生长至铺满培养皿底时停止分裂,这种现象称为________。 (2)图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为________,也可从灰鼠体内取出卵子,通过________后进行早期胚胎培养获得。 (3)图中重组囊胚通过________技术移入白鼠子宫内继续发育,暂不移入的胚胎可使用________方法保存。 (4)小鼠胚胎干细胞(ES)可由囊胚的________分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性,有望在对人类iPS细胞进行定向________后用于疾病的细胞治疗。 解析 本题考查动物细胞培养、体外受精、胚胎移植、干细胞培养的有关操作和知识。(1)原代培养指将动物组织用酶处理成单个细胞后进行的初次培养。接触抑制指贴壁的细胞分裂生长到表面相互接触时,细胞就会停止分裂增殖的现象。(2)将早期胚胎从母鼠子宫中吸取出来的方法叫冲卵。(3)暂不进行胚胎移植的胚胎可放入-196 ℃的液氮中冷冻保存。(4)胚胎干细胞简称ES或EK细胞,是由早期胚胎或原始性腺分离出来的一类细胞,iPS与ES细胞一样,可通过诱导定向分化修补某些功能异常细胞来治疗疾病。 答案 (1)原代培养 接触抑制 (2)冲卵 体外受精 (3)胚胎移植 冷冻(或低温) (4)内细胞团细胞 诱导分化 题后归纳 干细胞类型及培养过程 (1)类型 类别 来源或举例 特点 全能干细胞 桑椹胚或囊胚及以前 能发育成完整个体 多能干细胞 (胚胎干细胞) 内细胞团细胞、原始性腺细胞分离 能分化出动物体内的任何组织 专能干细胞 (成体干细胞) 骨髓干细胞、皮肤生发层细胞 能分化出特定的组织 (2)培养关键:需要一种能促进胚胎干细胞的生长,但抑制其分化的一种培养体系,这种体系就是饲养层细胞。 (3)培养过程 胚胎工程及其应用 2.(山东理综,35)胚胎工程是一项综合性的动物繁育技术,可在畜牧业和制药业等领域发挥重要作用。下图是通过胚胎工程培育试管牛的过程。 (1)从良种母牛采集的卵母细胞,都需要进行体外培养,其目的是________;从良种公牛采集的精子需________后才能进行受精作用。 (2)在体外培养受精卵时,除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外,还需要提供________气体以维持________。 (3)图中过程A称为________,它在胚胎工程中的意义在于________。 (4)研制能够产生人类白细胞介素的牛乳腺生物反应器,需将目的基因导入牛受精卵,最常用的导入方法是________;获得转基因母牛后,如果________,即说明目的基因已经表达。 解析 (1)人工采集的卵母细胞要在体外培养成熟后才能与获能的精子完成受精作用,同理,在体外受精前,要对精子进行获能处理。(2)体外培养受精卵所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。(3)将早期胚胎移入受体母牛子宫的过程称为胚胎移植,意义在于可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力。(4)基因工程中将目的基因导入动物细胞最常用的方法是显微注射法;获得的基因表达产物即母牛的乳汁中含有人类白细胞介素说明目的基因已经表达。 答案 (1)使卵母细胞成熟(或使卵母细胞获得受精能力) 获能 (2)CO2 培养液(基)的pH (3)胚胎移植 提高优良母畜的繁殖率 (4)显微注射法 牛奶中含有人类白细胞介素(或牛乳腺细胞已合成人类白细胞介素) 题后反思 (3)胚胎移植的供体和受体必须是同种生物,同一物种的动物才有可能具有相同的生理特征。 (4)两次检查:①收集胚胎检查;②移植后是否妊娠检查。 (5)冲卵含义:冲出早期胚胎,不是冲出卵子。 2.胚胎移植的生理学基础 生理学基础 意义 哺乳动物在发情排卵后的最初一段时期,不论是否妊娠,同种动物的供、受体生殖器官的生理变化相同 为供体的胚胎移入受体提供了相同的生理环境 早期胚胎形成后,在一定时间内不会与母体子宫建立组织上的联系,而是处于游离状态 为胚胎的收集提供了可能 受体对移入子宫的外来胚胎基本上不发生免疫排斥反应 为胚胎在受体内的存活提供了可能 供体胚胎可与受体子宫建立正常的生理和组织联系,但供体胚胎的遗传特性在孕育过程中不受任何影响 为移植后胚胎的继续发育提供了营养等方面的保障 多维课堂 · 师生互动 第3讲 胚胎工程 2015备考·最新考纲 1.动物胚胎发育的基本过程与胚胎工程的理论
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