第三节遗传信息的传递.pptxVIP

遗传信息的传递-----DNA复制;1953年4月25日《自然》杂志发表了沃森（J. Watson）和克里克（F. Crick）的DNA双螺旋结构模型，既反映了DNA分子的多样性和特异性，在这篇文章的结尾处又提出了DNA半保留复制的可能机制。但是DNA真的是一种能自我复制的分子吗？; 资料1：1956年科恩伯格以DNA双螺旋结构模型为基础，设想细胞内必有合成DNA所需的酶。于是他把大肠杆菌磨碎，用其提取液加上4种脱氧核苷三磷酸（其中1种进行放射性同位素标记），再加一点点微量DNA作为“模板”（如小牛胸腺DNA、大肠杆菌DNA以及??肠杆菌T2噬菌体DNA）。把上述混合液在有Mg2存在的条件下于37℃静置30min，发现放射性标记已进入DNA部分，说明有大量新合成DNA。随后，科恩伯格从大肠杆菌提取液中分离纯化出一种DNA聚合酶（催化DNA合成），也得到了上述实验结果。;科恩伯格测定了产物DNA的碱基组成，同模板DNA组成惊人地相似。;实验结论： （1）新合成的DNA的特异性是由 决定的； （2）DNA数量大大增加，说明DNA是一种 的分子；（3）说明在DNA聚合酶的作用下，以DNA的 作为模板进行 复制 ;这个模型曾被人们怀疑（Watson和Crick自己也怀疑），因为最大问题就是“双链是如何打开的？”。研究者为了避开“如何打开双链”这个难题，又提出了全保留复制和弥散（分散）复制（即亲代的双链被切成双链片段，复制完成后，“新旧”DNA 同时存在于同一条链中，这种复制机制被认为可以避免双链 DNA 解旋的问题）2个模型。;最早提出的DNA复制模型有三种；;问题①：请观察子代DNA，母链和子链发生结合的是那种复制方式？; 资料3：1957年，美国分子生物学家梅塞尔森(M.Meselson )和史塔尔 (F．W．Stahl )首次证明了DNA复制是按半保留方式进行的。 他们先将大肠杆菌放在含15N的简单培养基上培养多代,得到仅含15N-DNA的大肠杆菌，然后再加入一般的14N培养。分别取0代、1代、2代、3代的细胞，取DNA，进行CsCl密度梯度离心。由于含15N比含N14的DNA重，故亲代DNA分子最重，子代15N／14NDNA次之，只含14N的子代DNA分子最轻，因而采用CsCl密度梯度离心技术可产生分离。 CsCl密度梯度离心的过程：离心速度:60 000 rpm，离心时间:2 d，使离心管内的CsCl溶液形成自上而下逐渐变大的密度梯度，离心后不同密度的DNA分子就停留在与其密度相同的CsCl溶液处）。又根据DNA的碱基对紫外光的吸收性能，可运用紫外光谱分析法测定DNA含量。通过对离心管进行紫外光扫描摄影得到DNA分布的照片。梅塞尔森等人将他们的实验结果发表在美国科学院会议纪录上，题为《大肠埃希氏杆菌中DNA的复制》(1958)。;问题①：为什么选用大肠杆菌为实验材料？;问题③：复制后的DNA分子通常是随机混合在一起的，不易分离。梅塞尔森和斯塔尔用什么方法解决这个难题？原理是什么？ ;问题④：梅塞尔森-斯特尔用什么方法检测到了实验结果？;可以排除全保留模型，却不能排除分散复制模型。第二代离心结果只有1条中带，若是分散复制也是1条中带。;问题③：综合以上分析，DNA通过哪种方式进行复制的？;问题④：随着培养代数的增加，杂交带(15N /14N DNA)的“量”有何特点？轻带（14N -DNA）的量有何特点？;【检测1】某研究小组进行“探究DNA的复制过程”的活动，结果如图所示。其中培养大肠杆菌的唯一氮源是14NH4CI或15NH4CI。a、b、c表示离心管编号，条带表示大肠杆菌DNA离心后在离心管中的分布位置。下列叙述错误的是（ ） A.本活动运用了同位素示踪和密度梯度离心技术 B. a管的结果表明该管中的大肠杆菌是在含14 NH4CI的培养液中培养的 C. b管的结果表明该管中的大肠杆菌的DNA 都是14 N –15N-DNA D.实验结果说明DNA分子的复制是半保留复制的;三、课堂小结：