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第二章 发酵工业常用微生物及培养 第四章 发酵工业培养基及原料处理 本章要点： 熟悉发酵培养基类型、特点及其组成。 了解发酵工业对培养基的要求。 掌握发酵培养基设计的基本程序和原则，以及培养基优化的方法。 掌握淀粉质原料制糖工艺及其培养基的配制方法。 几个问题 1、微生物生长代谢所需要的营养物质 2、培养基的类型、发酵培养基的类型 3、发酵培养基的设计 4、发酵培养基的优化 5、发酵培养基的配制 第一节 发酵培养基的组成及其来源 一、培养基 是提供微生物生长繁殖和生物合成各种代谢产物所需要的，按一定比例配制的多种营养物质的混合物。 二、各类培养基的共同点 能源、碳源、氮源、无机元素、生长因子、水、氧气等。 发酵培养基还含有一些前体、产物促进剂和抑制剂等。 发酵培养基的组成： 碳源 氮源 无机盐和微量元素 水分 促进剂（如聚乙烯醇－改善通气性） 抑制剂 前体（如青霉素－苯乙胺） 碳源： 定义： 是指作为微生物细胞结构或代谢产物中碳架来源的物质。 来源： 无机物 有机物（主要的） 氮源： 作用： 氮元素是微生物细胞蛋白和核酸的主要成分，对微生物的生长发育有着特别重要的作用。 来源： 无机氮：速效氮 有机氮 气态氮 生理酸性物质： 经微生物代谢后形成酸性物质的无机氮源称为生理酸性物质。 如硫酸铵 生理碱性物质： 经微生物代谢后形成碱性物质的无机氮源称为生理碱性物质。 如硝酸钠 作用： 在发酵过程中可以引起pH值的变化，可以对微生物的培养基进行酸碱性调节。 无机盐和微量元素： 是指除碳、氮元素外其他各种重要元素及其供体。 作用： 构成菌体成分。 酶的组成或激活剂、抑制剂。 调节渗透压、菌体内部pH值、氧化还原电位。 特点： 无机盐尤其是微量元素在低浓度时对微生物的生长、产物合成一般有促进作用；高浓度时抑制作用，甚至是毒性作用。 磷元素 作用： 细胞膜的组成、可以活化糖类分子、是核苷酸之间的桥梁、是ATP的组成部分。 种类： 磷酸钾、磷酸氢二钠等。 对次级代谢的调节： 磷酸盐调节现象（高浓度磷酸盐抑制次级代谢的现象）。 硫元素 种类： 硫酸镁、硫酸钠等。 作用： 用于某些产物中含硫的特殊的发酵生产中。如青霉素、头孢霉素等发酵中，需要额外添加硫酸钠等硫源。 钙、镁、钾、钠、铁 钙： 作用：是很多酶的辅助因子或激活剂、渗透压调节剂。 种类：氯化钙，尽量不与磷酸盐同时添加。 镁： 作用：辅酶、激活剂。 种类：硫酸镁。 钾： 作用：是很多酶的辅助因子。 种类：磷酸氢二钾、磷酸二氢钾。 钠：调节细胞的渗透压。 铁：是细胞色素的组成成分。 前体： 是指一些添加到培养基中的物质，它们并不促进微生物的生长，但能直接通过微生物的生物合成过程结合到产物分子上去，自身结构基本不变，而产物产量却因此有较大提高的一类化合物。（p111） 前体的来源： 微生物细胞本身的代谢产物。 外源人为添加。 前体的应用： 氨基酸、核苷酸、抗生素等发酵。 如青霉素发酵中添加的玉米浆（主要含有苯乙酸）就是最早应用的前体。 注意事项： 添加的前体要适量。 产物促进剂（p112） 定义： 指在发酵过程中添加的，既不是营养物质又不是前体物质，但却能够使提高产量的物质。 产物促进剂的增产机制有多种。如添加甘露聚糖可以促进α-甘露糖苷酶的分泌，从而提高其产量。 产物抑制剂： 定义: 主要指对生产菌代谢途径有某种调节能力的物质。 这些物质使微生物代谢途径中原有的路径发生改变抑制了一些酶，抑制了一些杂菌的生长（如添加的抗生素）。 第二节 发酵生产中培养基的类型 按原料的纯度进行分类（p113） 按培养基的物理状态分类（p113） 按发酵工业中的作用分类 一、根据培养基的用途分类 （一）选择培养基 选择培养基： 根据某一类或某种微生物的特殊营养要求而设计的培养基，用于提高所需微生物的分离效率。 选择性培养基设计的两种主要方法: 一是根据某些微生物对碳源、氮源的需求而设计。 以纤维素为唯一碳源的培养基可用于分离纤维素分解菌； 用石蜡油来富集分解石油的微生物； 用较浓的糖液来富集酵母菌等。 如分离固氮微生物的无氮培养基、加入滤纸条或纤维素粉为碳源分离纤维分解菌的培养基。 二是根据某些微生物的物理和化学抗性设计的。 在培养基中加入某种化合物，可有效地分离出对这种化合物有抗性的微生物。 如分离放线菌时，在培养基中加入数滴10%的苯酚，可以抑制霉菌和细菌的生长； 在分离酵母菌和霉菌的培养基中，添加青霉素、四环素和链霉素等抗生素可以抑制细菌和放线菌的生长； 结晶紫可以抑制革兰氏阳性菌，培养基中加入结晶紫后，能选择性地培养革兰氏阴性菌； 7.5%NaCl可以抑制大多数细菌，但不抑制葡萄球菌，从而选择培养葡萄球菌。 德巴利酵母属(Debaryomyces)中的许多种和酱油中酵母能耐高浓