7. 紫外可见分光光度法 2016.ppt

紫外可见分光光度法 * * * q 何谓发色团和助色团？举例说明。 紫外可见分光光度计与可见分光光度计比较，有什么不同之处？为什么？ q 第一章　分光光度分析(Vis-UV Spectrophotometry) 第三章 紫外可见分光光度法 物质的紫外-可见吸收光谱的产生是由于? * * * 　　 1. 概念： 分光光度法是根据物质的吸收光谱和光的吸收定律，对物质进行定量、定性分析的一种仪器分析方法。 　　 2. 方法分类： 根据测定时所选用的光源： 　　?可见分光光度法 (400?800nm) 　　?紫外分光光度法 (200?400 nm) 　 　　 * * * 紫外-可见分光光度法是研究物质在紫外、可见光区的分子吸收光谱的分析方法。 它属于分子光谱法的一种，是利用某些物质的分子吸收200～800 nm光谱区的辐射来进行分析测定的方法。 这种分子吸收光谱产生于价电子和分子轨道上的电子在电子能级间的跃迁，广泛用于无机和有机物质的定性、定量测定。 * * * 2.朗伯—比耳定律 布格(Bouguer)和朗伯(Lambert)先后于1729年和1760年阐明了光的吸收程度和吸收层厚度的关系。 A∝b 1852年比耳(Beer)又提出了光的吸收程度和吸收物浓度之间也具有类似的关系。 A∝c 二者的结合称为朗伯—比耳定律，其数学表达式为： A = εb c 朗伯—比耳定律是吸光光度法的理论基础和定量测定的依据。 * * * 光吸收定律的适用范围 朗伯—比耳定律适用于 1.使用单色光为入射光； 2.溶液均匀，非散射光； 3.溶液为稀溶液。 在实际工作中经常发现标准曲线不成直线的情况，特别是当吸光物质的浓度高时。 A C * * * 特点: ① 具有最大吸收波长。 ②不同浓度的同一种物质，其吸收曲线形状相似，?max不变。但是不同物质，其吸收曲线形状和?max不一样，所以可作为定性分析的依据。 ③ 不同浓度的同一种物质，在?max处吸光度随浓度变化的幅度最大，测定的灵敏度最高，所以通常选取在?max处测量。 * * * 有机化合物的紫外-可见吸收光谱 1）生色团：含有π键的不饱和基团，简单的生色 团由双键或三键组成（如乙烯基、乙炔基等） 3、常用术语 * * * 2）助色团：本身没有生色功能（不能吸收波长大于200nm的光），但当与生色团连接时，有增强生色团生色能力的基团（如—OH，—NH2，—NHR等） * * * 4、常见有机化合物的紫外可见吸收光谱 （1）270-750nm 无吸收峰。饱和化合物，单烯。 （2）270-350 nm有吸收峰（ε=10-100L/（mol*cm）），n→π* 跃迁，含有一个简单的非共轭且含有n电子的生色团 （3）250-300 nm 有中等强度的吸收峰, （ε=200-2000L /（mol*cm ），如苯环。 （4）210-250 nm有强吸收峰，表明可能含有2个共轭双键；在260nm, 300 nm, 330 nm有强吸收峰，说明是3个或3个以上双键的共轭体系。 （5)若吸收峰延伸至可见光区，则可能是长链共轭或稠环化合物 * * * 紫外可见分光光度计 光源 单色器 吸收池 检测器 显示系统 0.575 光源 单色器 吸收池 检测器 显示 * * * 作用--提供入射光 在整个紫外光区或可见光谱区可以发射连续光谱，具有足够的辐射强度、较好的稳定性、较长的使用寿命。 可见光区：钨灯作为光源，其辐射波长范围在320～2500 nm。 紫外区：氢、氘灯，发射200～375 nm的连续光谱。 1. 光源 * * * 2.单色器 作用：将光源发射的复合光分解成单色光并可从中选出一任波长单色光。 ①入射狭缝：光源的光由此进入单色器； ②准光装置：透镜或返射镜使入射光成为平行光束； ③色散元件：将复合光分解成单色光；棱镜或光栅； ④聚焦装置：透镜或凹面反射镜，将分光后所得单色光聚焦至出射狭缝； ⑤出射狭缝。 * * * 3. 样品室 样品室放置各种类型的吸收池（比色皿） 和相应的池架附件。 在紫外区须采用石英池，可见区可用玻璃池。 注意： 用作盛空白溶液的比色皿与盛试样溶液的比色皿应互相匹配，即有相同的厚度与相同的透光性。为