不上 9 第九章 仪器分析法选介.ppt

第九章 紫外-可见分光光度法 物质对光的选择性吸收 当光束照射到物质上时，光与物质发生相互作用，于是产生反射、散射、吸收或透射，如图右所示。 9.1.2 光的吸收基本定律 2. 偏离朗伯－比耳定律的原因 引起偏离朗伯－耳定律的原因主要有以下几个方面： 物理因素： 由于入射光不是单色光而引起的偏离 朗伯－比耳定律只适用于单色光。但实际上单波长的光不能得到。目前各种方法所得到的入射光是具有一定波长范围的波带，而非单色光。因而发生偏离朗伯一比耳定律的现象。单色光的纯度愈差，吸光物质的浓度愈高，偏离朗伯-比耳定律的程度愈严重。在实际工作中，若使用精度较高的分光光度计，可获得较纯的单色光。 （2） 溶液中的化学变化引起的偏离 溶液中的化学变化如缔合、离解、溶剂化、形成新的化合物、互变异构等，使吸光度不随溶液浓度而成正比地改变，而导致偏离朗伯－比耳定律。 例如，重铅酸钾在弱酸性介质中有如下平衡： Cr2O72- +H2O 2HCrO4- 在450nm波长处测量不同浓度重铬酸钾溶液的吸光度。由于在浓度低时重铬酸根的离解度大，而浓度高时离解度小，同时由于铬酸氢根离子（HCrO4-）的摩尔吸光系数比重铬酸根离子的摩尔吸光系数要小得多，因此低浓度时重铬酸根离子的吸光度降低十分显著，这就使工作曲线偏离朗伯和耳定律。 显色反应：对一些本身在可见光区没有吸收或有吸收但摩尔吸光系数很小的物质，不能直接用光度法测定，加入一定的试剂，使之反应转化为摩尔吸光系数较大的有色物质后再测定，此转化反应称为显色反应，试剂为显色剂 显色反应主要有下述两种类型： 配位反应 氧化还原反应 （1）配位反应 这是最常用的方法.许多配位离子和配合物有较深的颜色,可以用于鉴定某些金属离子、阴离子或有机化合物.配位剂可以是无机配位剂,如:H2O2能使Ti4+显色,但目前更多的是使用有机配位剂，如用磺基水磺酸测定Fe2+ 这类有机试剂一般含有生色团和助色团，生色团是含有共轭双键的基团，如-N=N-(偶氮基)，-N=O(亚硝基）等,助色团是含有共用电子对的基团。 （2）氧化还原反应 一些离子可以通过氧化还原反应,使其成为有色离子.如Cr、Mn可氧化成CrO42-、Cr2O72-、MnO4-等有色离子而加以鉴定.钼酸胺可与磷酸、砷酸、硅酸等生成杂多酸,在一定条件下,杂多酸中的钼可还原成钼蓝,从而可以进行P、As、Si等微量元素的比色测定.利用形成钼蓝反应还可以测定一些还原性物质，例如糖类等。 利用氧化还原反应可以测定很多能变色的有机物,例如利用2,3,5-三苯四氯唑和蓝四氮唑,可以测定醛、酮糖等还原性物质。 影响显色反应的因素 （1）显色剂用量 显色反应一般可以用下式表示： M + R ＝ MR 为了减少反应的可逆性，根据同离子效应，加入过量的显色剂是必要的，但过量太多，有时会有副反应产生，反而不利。 显色反应条件（2） 显色反应pH 配位数和水解等与 pH 有关，通过实验确定 显色反应条件（3） 确定显色温度及显色时间 （4）干扰离子的消除 对于干扰离子的消除通常采用下述方法。 （1）加入配位剂掩蔽干扰离子 如测Ti4＋时，Fe3＋黄色干扰，可加H3PO4使其成为Fe(PO4)3-（无色）。 （2）调节溶液酸度 如硅钼蓝在酸度4～6mol/L仍然稳定，但磷砷钼蓝在1.6mol/L以上时则被破坏。 参比溶液的选择 溶剂参比：试样组成简单、共存组份少（基体干扰少）、显色剂不吸收时，直接采用溶剂（多为蒸馏水）为参比； 试剂参比：当显色剂或其它试剂在测定波长处有吸收时，采用试剂作参比（不加待测物）； 试样参比：如试样基体在测定波长处有吸收，但不与显色剂反应时，可以试样作参比（不能加显色剂）。 平行操作溶液参比：用不含被测组分的试样，在相同条件下与被测组分进行同样的处理，然后做为参比。 双波长光度计光路示意图 3 配合物的组成比的测定 1. 物质的量比法（饱和法） 2. 连续变化法（Job法） 4.紫外分光光度法定性分析简介 (一) 显色反应的要求 (1) 选择性要好 (2) 灵敏度要高 (3) 有色化合物的组成要恒定，化学性质要稳定 (4) 有色配合物组成恒定 (5) 色差大： 一般要求有色化合物的最大吸收波长与显色剂的最大吸收波长之差在60nm以上： pH1pHpH2 利用缓冲溶剂保持 T1(?C) T2(?C) t1(min) t2(min) T(?C) t(min)