细胞工程-6细胞融合.pptVIP

融合过程中两个细胞膜的变化过程 类脂质分子发生扰动和重排 导致细胞桥的形成 细胞质、核相互融合 灭活后的病毒颗粒结合到细胞表面。两受体细胞开始凝聚。 两细胞的膜紧密结合。病毒被膜与受体细胞的浆膜融合。病毒颗粒周围的膜脱离整个膜，产生破口，在两细胞间形成细胞质通道（37℃、1-2min），通道继续扩大，病毒颗粒流入细胞质内，细胞质互相融合。 融合细胞变圆，融合结束。 优点： 操作简单；适用范围广；无需外源 因子；毒性低；融合率高；参数易控制； 可用于微量细胞融合；可在显微镜观察下定向诱导细胞融合并直接挑选杂交细胞。 缺点： 仪器昂贵，在融合大小不同细胞时存在问题；在融合膜成分差异较大的细胞时存在困难 （二）融合细胞的筛选 细胞融合是一个随机的物理过程，经融合后细胞将以多种形式出现，需要通过培养和筛选，除去不需要的细胞，分离出需要的杂种细胞，从而解决融合细胞的选择问题。 基于酶缺陷型细胞 基于药物抗性所建立的杂种筛选 3. 基于营养缺陷型细胞所建立的杂种筛选 4. 由温度敏感突变型细胞组成的杂种细胞的筛选 5. 具有所需性状的杂种细胞的筛选 1. HAT选择系统－－基于酶缺陷型细胞杂种筛选 HAT是含一定浓度次黄嘌呤（Hypoxanthine,H）、氨基喋呤（ Aminopterin，A ）及胸腺嘧啶核苷（Thymidine，T）的一种选择性培养基，