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第五章 微生物的生长繁殖与生存因子 第一节 微生物的生长繁殖 微生物生长繁殖的概念 研究微生物生长的方法 细菌生长曲线在污废水处理中的应用 微生物生长量的测定 基本概念 生长:微生物在适宜的环境条件下,不断吸收营养物质,按照自己的代谢方式进行新陈代谢活动。当同化作用大于异化作用时,微生物的细胞的迅速增大。(细胞质量的增加和个体体积的加大,即细胞组分与结构在量方面的增加) 繁殖:当单细胞个体生长到一定程度时,由一个亲代细胞分裂为两个大小、形状与亲代细胞相似的子代细胞,使得个体数目增加(质的变化)。 基本概念 发育:从生长到繁殖由量变到质变的过程。 世代时间:细菌两次细胞分裂之间的时间。 在一定的培养条件下,微生物的世代时间是一定的,当环境条件发生改变,其世代时间也会改变 原核微生物的繁殖速度一般比真核微生物快,专性厌氧菌的世代时间多数比好氧菌的长 研究微生物生长的方法 微生物的生长可分为个体微生物生长和群体微生物生长。多数通过培养研究其群体生长。 细菌生长曲线 处于对数生长期的细胞,由于代谢旺盛,生长迅速,代时稳定,个体形态、化学组成和生理特性等均较一致,因此,在微生物发酵生产中,常用对数期的菌体作种子,它可以缩短停滞期,从而缩短发酵周期,提高劳动生产率与经济效益。对数生长期的细胞也是研究微生物生长代谢与遗传调控等生物学基本特性的极好材料。 静止期 死亡原因— 营养短缺、代谢毒物增多 (相当于重量变化曲线中的增长率下降阶段) 衰亡期(老年) 提问:哪个时期(迟缓期、对数期、稳定期、衰亡期)代时最具有种属代表性?为什么? 微生物的生长曲线,反映一种微生物在一定的生活环境中 ( 如试管、摇瓶、发酵罐 ) 生长繁殖和死亡的规律。它既可作为营养物和环境因素对生长繁殖影响的理论研究指标,也可用为调控微生物生长代谢的依据,以指导微生物生产实践。 通过对微生物生长曲线的分析,可见: ① 微生物在对数生长期生长速率最快。 ② 营养物的消耗,代谢产物的积累,以及因此引起的培养条件的变化,是限制培养液中微生物继续快速增殖的主要原因。 ③ 用生活力旺盛的对数生长期细胞接种,可以缩短延迟期,加速进入对数生长期。 ④ 补充营养物,调节因生长而改变了环境pH 、氧化还原电位,排除培养环境中的有害代谢产物,可延长对数生长期,提高培养液菌体浓度与有用代谢产物的产量。 ⑤ 对数生长期以菌体生长为主,稳定生长期以代谢产物合成与积累为主。根据发酵目的的不同,确定在微生物发酵的不同时期进行收获。微生物生长曲线可以用于指导微生物发酵工程中的工艺条件优化以获得最大的经济效益。 连续培养 一方面连续进料,另一方面又连续出料。 原理:进料=补足营养(“污染物”) 出料=稀释菌浓度、毒物浓度 它又分为两种:恒浊连续培养、恒化连续培养。 细菌生长曲线在污水处理中的应用 不同废污水生物活性污泥处理法中,其活性污泥中微生物的生长状态不同,或处于静止期,或处于对数期,或处于衰亡期等 在废水生物处理设计时,按废水的水质情况(主要是有机物浓度),可利用不同生长阶段的微生物处理废水 微生物生长量的测定方法 (一)直接计数法(测微生物总数) 借助显微镜观察测定 2.涂片染色法 1视野菌液(ml)=(0.01ml /1cm2)*视野面积(cm2) 3.比例计数法 比例——样品菌液与等体积的血液混合,观测二者比例 提问:如果平均每个视野中细菌数量/红血球的数量比例为5.5:1,则细菌数量=? 5.5×400万个/m l =2.2×107个/mL样品 红血球数已知(男性400~500万个/ml,女性350~450万个/ml),平均400万个/ml 细菌 红血球 * 生长——细菌群体数量的增长,不是个体体积的增长。 提问:为什么这里不考察细菌个体的生长呢? 个体太小,难观察计量 群体细菌对环境产生影响 各类细菌都是倾向于群居(物以类聚) 一山不容二虎 提问:弱势生物的群居优势是什么? 生存状况提高,攻防具佳 (攻)群居的细菌获得营养的能力大大高于游离的细菌, (防)群居的细菌不易被天敌伤害,还能释放类似外激素的调节因子,使群体主动适应环境的变化,可有性生殖; 团结就是力量 外界因素引起的细菌数量的增加、停滞、衰减等变化。 提问:如何研究呢? 测菌数量变化与外因的关系 细菌群体力量改变环境 通常都是将细菌群体作为研究对象,考察细菌群体的生长规律——“生、老、病、死”。 提问:细菌群的“生、老、病、死”表现为何呢? “生、老、病、死” (根据投食方式)分间歇式培养(分批培养)、连续式培养两种情况 1.间歇培养 提问:如何人工进行细菌间歇培养? 开始时的一次性投料和接种细菌(其余时间细菌根据环境变化自行生灭) 研究微生物生
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