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量子点纳米晶的制备及其在生物分析中的应用 量子点纳米晶 量子点 (Quantum dots)有时也叫纳米晶,它是纳米尺度原子和分子的集合体,一般粒径范围在2-20nm。量子点即是将材料尺寸在三维空间进行约束,并达到一定的临界尺寸(抽象成一个点)后,材料的行为将具有量子特性(类似在箱中运动的粒子),结构和性质也随之发生从宏观到微观的转变。 生物标记技术(Biomarker) 量子点在生物分析中的应用 研究较多的量子点主要由II-VI族或III-V 族元素组成 与传统的荧光探针相比,量子点的激发光谱宽,且连续分布,即不同大小的纳米晶体能被单一波长的光激发而发出不同颜色的光,而发射光谱成对称分布且宽度窄,并且光化学稳定性高,不易光解 。 量子点作为一种荧光探针在生物标记及诊断领域有着广泛的应用前景。(Nature , 2001 , 413 : 450-452) 量子点的合成 1 有机体系 2 水相体系 有机金属法 优缺点 量子效率高 (可达 90 %) 荧光半峰宽窄 (仅有 30 nm) 是目前合成高质量量子点最成功的方法之一 反应条件过于苛刻,严格的无氧无水操作 原料价格昂贵,毒性太大,且易燃易爆 有机“绿色化学”法-改进的有机金属法 选用毒性小的金属氧化物(CdO) 或盐(Cd(OOCCH3)2,CdCO3) 选用长烷基链的酸、氨、磷酸、氧化磷为配体; 以高沸点有机溶剂为介质 降低了成本和对设备的要求 减少了对环境的污染 大多数生物分子都是亲水的,有机相中的纳米晶必须通过进一步的表面亲水修饰才能具备生物亲合性,亲水修饰过程不但需要复杂的表面配体交换,而且会破坏量子点的发光性质。 通过回流使纳米晶逐渐成核生长,由于水的沸腾温度为 100℃,纳米晶没有明确的生长界限导致量子点荧光半峰宽较宽,量子效率也较低,(仅有 3~10%) 离心分级 (选择性沉淀) 来提高其量子效率 水热法制备 CdTe 纳米晶 为在水溶液中直接设计合成高质量的纳米晶开辟了新的途径 未经任何处理即可用于生物标记 荧光量子点表面修饰 量子点表面修饰 树枝状分子配体修饰的量子点 量子点与蛋白的偶联 随着人类基因组计划(HGP)的顺利完成,蛋白质组的研究已经成为生命科学的一个重要领域. 需要建立一些快速、高效、高通量的蛋白质分析方法.量子点荧光探针在一些方面能满足这些要求。 Willard等人将巯基乙酸修饰的量子点与生物素标记的牛血清白蛋白(QD-bBSA)结合后,使之与四甲基罗丹明标记的亲和素(Sav-TMR) 作用,结果观察到量子点与四甲基罗丹明(TMR)之间有荧光共振能量转移现象的发生。 Science 1998, 281:2016-2018. 这一结果表明,量子点可在蛋白质-蛋白质键合分析中作为荧光共振能量转移的供体. 另外,将量子点与蛋白质芯片技术相结合,可大大提高蛋白质芯片检测的灵敏度。 量子点在其他方面的应用 量子点用于活体方面的研究 将不同的CdSe/ZnS核-壳型量子点表面用不同的多肽修饰后,注射到老鼠体内,对活体切片后进行分析. 结果发现:不同多肽修饰的量子点可特异性的结合到正常或发生肿瘤老鼠的肺部脉管系统。 展望 量子点在基因组学、蛋白质组学、药物筛选以及细胞成像等方面有着广泛应用前景,将量子点用于活体的实时、动态检测是目前的一个发展方向. 另外,应用多色量子点发展平行的生物传感和检测技术也是目前的一个发展热点,这些技术将把微流控技术、微阵列技术及量子点的优点集中起来,有着广阔的发展前景. 磁性纳米材料及其在生物医学中的应用 生物体系的纳米结构矿化 自然界中充满了各具特性的生物矿化材料。贝壳、珊瑚、鱼骨、牙齿、细菌中的磁性晶体等仅仅是生物所设计的众多生物矿物种类的一小部分。无机矿物与有机高分子共同构成许多复杂的生物材料,这些材料具有各种各样的形状,同时也具有各种功能,其结构这精细,功能之优异令人叹服 。 生物矿化材料的主要无机成分,即碳酸钙、磷酸钙、氧化硅,、和铁氧化合物,均广泛存在于自然界中,甚至有的矿物(方解石、羟基磷灰石)从组成和结构方式来看与岩石圈中相应的矿物都是相同的,但一旦受控于这种特殊的生命过程,便具有常规陶瓷不可比拟的优点。 生物矿化:以生物材料为模板的无机结构材料的生成生物矿化常见的元素: 氢、碳、氧、镁、硅、磷、钙、锰及铁生物体内的其他基本元素 氮、氟、钠、钾、铜、锌等则很少矿化非生物所需元素银、金、铅、铀等出现在外细胞壁中,而细胞内部则有锶、钡等元素沉积 生物矿物的种类和功能 20世纪 20-30年代,德国、丹麦、瑞典的学者有偏光显微镜对生物矿物进行系统的观察50-60年代,西北欧及美国的学者借助TEM和SEM对生物矿物做了深入研究并建
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