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国外医学临床生物化学与检验学分册2004 年 5 月第 25 卷第 3 期　Sect Clin Biochem Lab Med Foreign Med Sci ,May 2004 ,Vol 25 ,No. 3 2·14 · ·综述· RNAi 实现策略的新进展 朱汝森 综述 　刘新光 　梁念慈 审校 ( ) 　　【摘要】　RNA 干扰 RNAi 是指具有同源性的双链 RNA 导致靶 mRNA 发生序列特异性降解的 现象。随着对 RNAi 分子机制研究的深入 ,该技术在哺乳动物的实现策略不断改进 ,最初是以化学方 法合成小干扰 RNA (siRNA) , 目前则更多是以重组载体在细胞内表达siRNA ,而且可以实现对全器官 乃至个体范围的可传代性 RNAi 效应。如今 RNAi 技术已经被广泛应用于功能基因组学和基因治疗 学等方面的研究。 【关键词】　RNA/ 遗传学 ; 　RNA ,双链 ; 　转录后基因沉默 ( 　　1998 年 ,有研究者首次发现向秀丽线虫 C. ele 长 dsRNA 时 ,会导致细胞内发生非特异性的基因沉 gans) 注射双链 RNA ( doublestranded RNA , dsRNA) 默 ,其原因是 dsRNA 激活了双链 RNA 依赖的蛋白激 能够高效地特异性阻断相应基因的表达 ,他们把这一 ( ) 酶 dsRNAdependent protein kinase , P KR 途径 , P KR ( ) α 现象命名为 RNA 干扰 RNA interference ,RNAi 。随 使 EIF2 因子发生磷酸化 ,从而非特异性地抑制翻 后的研究表明 , RNA 干扰作为古老的生物学途径广 译过程[2 ] 。后来 , Elbashir SM 等[3 ] 发现转染 21nt 的 泛地存在于从真菌到植物、从无脊椎动物到哺乳动物 siRNA 近似物能够在哺乳动物细胞内产生 RNAi 效 的各种生物中。现主要介绍 RNA 干扰技术在哺乳动 应 ,且不激活 P KR 途径 ,因而不会导致非特异性的基 物的实现策略方面的最新进展。 因沉默。这些发现引导科学家们开始尝试通过首先 化学合成 19～21nt 的 siRNA 类似物 ,然后再转染哺 RNAi 的分子机制 乳动物细胞的方法来实现 RNAi , 并取得了显著的成 在动物或植物细胞内双链 RNA 会导致胞内与其 功。 ( 同源的 mRNA 发生转录后基因沉默 posttran 然而 ,化学合成的方法有着自身的缺点 , 即只能 scriptional gene silencing ,PTGS) ,被称之为 RNA 干扰 产生短暂的效应 ,并且对靶 mRNA 的特定序列有着 现象。RNAi 的分子机制主要是从对植物、线虫和果 很强的选择偏向性 ,需要多次试验才能筛选到有较强 蝇的研究中推导出 ,其途径可概括为三个步骤[1 ] : ( 1) 作用的 siRNA 。再者 ,RNA 合成的费用也相当昂贵。 作为“引发物”的 dsRNA 被一种名为 Dicer 的A TP 依