高中人教版生物选修三基因工程基本实际操作程序讲义.pptVIP

2、表达载体的组成 1）启动子 2）终止子 3）目的基因 4）标记基因等 2、将目的基因导入动物细胞 ①方法：显微注射法 ②程序： 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定： 归纳步骤 检测目的基因是否转录出了mRNA 提取受体生 物的mRNA 用同位素标记的 目的基因片段杂交 显 出 杂交带 （表明目的基因已转录出了mRNA） 检测DNA利用的是DNA与DNA杂交，检测mRNA利用的是DNA与mRNA杂交。 检测目的基因是否翻译出蛋白质 抗原—抗体杂交技术 提取受体生 物的蛋白质 与相应抗体杂交 显 出 杂交带 （表明目的基因已形成蛋白质产品） DNA分子杂交示意图 采用一定的技术手段，将两种生物的DNA分子的单链放在一起，如果这两个单链具有互补的碱基序列，那么，互补的碱基序列就会结合在一起，形成杂合双链区；在没有互补碱基序列的部位，仍然是两条游离的单链。 P15思考与探究 （二）、鉴定（个体生物学水平） 2、检测目的基因是否转录出了mRNA 3、检测目的基因是否翻译成蛋白质 抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 ①方法: 分 子 杂 交 方法: 抗