革兰氏染色教案资料.pptVIP

革兰染色 一、染色标本的制备 1、涂片：载玻片上滴加生理盐水一滴，接种环取待检菌培养物少许，研入无菌生理盐水中，形成一个极薄的均匀的菌膜，直径在1cm左右为宜。如果时液体培养物则直接取少许菌液涂成菌膜。 2、干燥：室温自然干燥即可。也可在远离火焰上方的空气中干燥。切记不可太近火焰，以免烤焦废弃。 3、固定：一般用加热法固定。将载玻片迅速来回通过火焰3次，以玻片触及皮肤热而不烫为度。这样可以使菌体粘附于载玻片上。加热还可杀死细菌，改变细菌细胞膜的通透性，易于染色。也可用甲醇、乙醇等化学药品固定。 三、染色方法 1、单染色法：仅用一种染料对细菌进行染色，操作简单。可观察细菌的形态、大小及排列，但不能显示细菌的结构及染色特性。分为染色、水洗、干燥三个步骤。染色剂为亚甲蓝或碱性复红染色液。 三、染色方法 2、复染色法：用两种或以上的碱性染料先后对细菌进行染色。可观察细菌的形态、大小及排列，能显示细菌的结构及染色特性，还有鉴别细菌的作用。常用革兰染色法。通过此法染色，可将细菌鉴别为革兰阳性菌（G+）和革兰阴性菌（G-）两大类。丹麦细菌学家G.Gram发明而得名。 2.1实验材料：大肠埃希菌，金黄色葡萄球菌18-24h培养物；草酸铵结晶紫染液；沙黄染液；生理盐水；95%乙醇；卢戈碘液；二甲苯；接种环；酒精灯；显微镜等。 2.2、染色方法：包括初染、媒染、脱色、复染、镜检、结果分析等步骤。