研究生基因表达调.ppt

1、帽子结构 RNA 剪接 可变剪接 意义之二 RNA的编辑是对mRNA前体的序列进行的改编。 在mRNA 前体分子的碱基序列中： 删去C、插入U：C被U取代； 删去G、插入A：G被A取代。 ? RNA编辑的加工方式，大大增加了mRNA 的遗传信息流量。 鸦片促黑皮质素原(POMC)的水解修饰 第四节 原核生物基因表达的调控?  依赖Rho (ρ)因子的转录终止 非依赖Rho因子的转录终止 （4）螺旋-环-螺旋模体（HLH） 第一步（起始阶段）是较长dsRNA在ATP参与下被RNaseⅢ样的特异核酸酶切割加工成21-23nt的由正义和反义链组成的小干扰RNA（small interfering RNA，siRNA）。 第二步（效应阶段）是siRNA 在ATP参与下被RNA解旋酶解旋成单链，并由其中反义链指 导形成RNA诱导的沉默复合体(RNA-induced silencing complex，RISC)。 除上述RNAi机制外，转基因真核生物中的dsRNA尚可引起相应基因的甲基化和染色质重构、凝集、异染色质化，基因甲基化和异染色质化还可能促使异常RNA（aberrant RNA）产生，最终导致基因沉默。 RNAi的放大效应机制 siRNA不仅可引导RISC切割靶RNA，而且可作为引物在RNA依赖的RNA聚合酶(RdRP)作用下以靶mRNA为模板合成新的dsRNA。 新合成的长链dsRNA同样可被RNaseⅢ样核酸酶切割、降解而生成大量的次级siRNA。次级siRNA又可进入合成-切割的循环过程，进一步放大RNAi作用。 RNAi 的特点 转录后水平的基因沉默 较高特异性：能够非常特异地降解与之序列相应的单个内源基因的mRNA。 高效性：相对少量的dsRNA就可以使相应的基因表达受抑制。 可遗传性及远距离效应：RNAi基因表达的效应可以突破细胞的界限，可传递给子一代。 （3）亮氨酸拉链模体（leucine zipper） 两个蛋白质分子近C端肽段各自形成两性α-螺旋，α-螺旋的肽段每隔7个氨基酸残基出现一个亮氨酸残基，两个α-螺旋的疏水面互相靠拢，两排亮氨酸残基疏水侧链排列成拉链状形成疏水键使蛋白质结合成二聚体，α-螺旋的上游富含碱性氨基酸（Arg,Lys），肽段借Arg,Lys侧链基团与DNA的碱基互相结合而而实现蛋白质与DNA的特异结合。 常结合CAAT盒 这种蛋白质模体由两个两性α-螺旋通过一个肽段连接 形成螺旋-环-螺旋结构。 二聚体 N端 富含碱性氨基酸 两个蛋白质通过两性螺旋的疏水面互相结合，与DNA结合则依靠此模体附近的碱性氨基酸侧链与DNA的结合而实现。 参与RNA-polⅡ转录的TFⅡ （三）mRNA 转录激活及其调节 POL-Ⅱ TFⅡF ⅡA ⅡB 由RNA-Pol Ⅱ催化转录的PIC POL-Ⅱ TFⅡF ⅡH ⅡE TBP TAF TFⅡD-ⅡA-ⅡB-DNA复合物 TATA ⅡA ⅡB TBP TAF TATA ⅡH ⅡE CTD- P PIC组装完成，TFⅡH使CTD磷酸化 TATA DNA polⅡ TFⅡH TAF TFⅡF TAF TAF TFⅡA TFⅡB TBP 真核RNA聚合酶Ⅱ在转录因子帮助下，形成的转录起始复合物 TBP相关因子 EBP 增强子结合蛋白 拼板理论(piecing theory) 一个真核生物基因的转录需要3至5个转录因子。转录因子之间互相结合，生成有活性，有专一性的复合物，再与RNA聚合酶搭配而有针对性地结合、转录相应的基因。 四、翻译水平的调控 （一） mRNA的稳定性对翻译的影响 真核生物基因的翻译调控的一个重要作用是控制 mRNA的稳定性。 1、5′帽子结构的调控作用 2、3′ PolyA尾的调控作用 3、 mRNA的去稳定元件 4、 RNA干涉（RNA interference ,RNAi ） RNAi 是近年来发现的在生物体内普遍存在的一种古老的生物学现象,是由与靶基因序列同源的双链RNA（dsRNA）介导的、由特定酶参与的特异性基因沉默现象。 RNAi 广泛存在于从真菌到高等植物、从无脊椎动物到哺乳动物各种生物中。它是真核生物中存在的一种抗病毒入侵、抑制转座子活动、调控基因表达的监控机制，具有重大生物学意义。 RNA干涉（RNA interference ,RNAi ） siRNA的两条单链末端为5’－磷酸和3’－羟基，且3’端均有２~3个突出的核苷酸。果蝇中的RNaseⅢ样核酸酶称为Dicer。 Di