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本章的目的要求: 掌握:微生物基因突变的一般规律 原核生物的基因重组、 营养缺陷型的筛选、 基因工程的主要步骤。 质粒的特征 了解:遗传物质的证明 微生物基因组结构 基因组测序 几个概念 遗传(heredity): 亲代生物传递给子代一套实现与其相同形状的遗传信息。 特点:具稳定性。 遗传型(genotype): 又称基因型,指某一生物个体所含有的全部基因的总和 是一种内在可能性或潜力。 表型(phenotype): 指生物体所具有的一切外表特征和内在特性的总和; 是具一定遗传型的生物在一定条件下所表现出的具体性状。 遗传型 + 环境条件 表型 变异(variation): 生物体在外因或内因的作用下,遗传物质的结构或数量发生改变而导致表型改变。 变异的特点: a. 群体一般为10-6~10-10; b. 形状变化的幅度大; c. 变化后形成的新性状是稳定遗传的。 饰变(modification): 指不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。 特点: a.几乎整个群体中的每一个个体都发生同样的变化; b.性状变化的幅度小; c.因遗传物质不变,故饰变是不遗传的。引起饰变的因素消失后,表型即可恢复。 第一节遗传的物质基础 一.DNA作为遗传物质 1.Griffith转化实验 1928 英国 1944年 O.T.Avery 活R菌+ ①加S菌DNA ②加S菌DNA及DNA酶以外的酶 ③加S菌的DNA和DNA酶 ④加S菌的RNA ⑤加S菌的蛋白质 ⑥加S菌的荚膜多糖 2. T2噬菌体感染实验 二.RNA作为遗传物质 TMV拆分重建实验 遗传物质在微生物细胞内 存在的部位和方式 7个水平 细胞水平 遗传物质集中在核内或核区 细胞核水平 核基因组;细胞质基因 染色体水平 单倍体和双倍体 核酸水平 核酸种类、结构;DNA长度 基因水平 最小的遗传功能单位 密码子水平 3个核苷酸代表一个氨基酸 核苷酸水平 核苷酸是一个最低突变单位 第二节 微生物的基因组结构 基因组概念 一.E.coli基因组 原核生物 结构特点 1.遗传信息的连续性 一条染色体,DNA含量少,大部分DNA用来编码蛋白质 2.功能相关的结构基因组成操纵子功能相关基因丛集排列,有利于调节。 3.结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝 4.基因组重复序列少而短 二.啤酒酵母基因组 真核生物基因组结构特点 1、基因组大,多个染色体 2、mRNA单顺反子结构 3、断裂基因,(有内含子) 4、基因组重复序列多 (遗传丰余) 三.詹氏甲烷球菌的基因组 古生菌基因组结构特点 1、类似原核生物: 环状染色体 操纵子结构 无内含子,无核膜 2、类似真核生物: 复制、转录、翻译——RNA聚合酶、启动子、延伸因子、复制起始因子、有组蛋白 第三节 质粒与转座子 一. 质粒:独立于染色体外,能进行自我复制的细胞质遗传因子 二.质粒主要类型 1.F因子 分子量 4种 F+,F-,Hfr, F‘ 2.R因子 3.Col因子 4.产毒素质粒 5.Ti质粒 6.降解质粒 三.质粒的特性 1.能独立复制 2.带次要性状 3.可整合,可游离,可细胞间转移 4.不亲和性 5.口丫啶类染料可消除之 松弛型质粒 严紧型质粒 四.转座因子类型与分子结构 转座子(Tn):存在于染色体DNA上可自主复制 和位移的基本单位,最简单的为 插入序列。 类型 IS ---插入序列 Tn----复合转座子 Mu---噬菌体 结构 (1) 简单转座子:IS 不含有任何宿主基因 末端反向重复序列, 编码转座酶 转座时引起靶位点正向重复 (2) 复合式转座子 复合式转座子(composite transposon)是一类带有某些抗药性基因(或其他基因)的转座子,其两翼往往是两个相同或高度同源的IS序列,表明IS序列插入到某个功能基因两端时就可能产生复合转座子。 TnA家族 TnA家族没有IS序列、体积庞大 (5
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