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- 2019-09-29 发布于湖北
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第二章 基因工程制药 基因工程是将一种生物的基因分离出来,在体外进行酶切和连接插入载体构成遗传物质的新组合,导入另一种宿主细胞使目的基团得到复制和表达的技术。 基因工程可生产的主要药物是指医用活性蛋白和多肽,包括免疫性蛋白、细胞因子、激素、酶等。 2.1 基因工程药物生产的过程 2.2 目的基因的获得 2.3 基因的表达 2.4 基因工程菌生长代谢的特点 2.5 基因工程菌的稳定性 2.6 基因工程菌的发酵 2.7 基因工程药物的分离纯化 2.8 包含体的复性 2.9 基因工程药物的质量控制 2.1 基因工程药物生产的过程 2.2 目的基因的获得 一、构建基因文库 二、构建cDNA文库 三、 PCR方式 先决条件:已知目的基因的DNA序列。 原核:以基因组为模板 反转录PCR(RT-PCR):提取mRNA,反转录生成cDNA作为模板进行PCR扩增获得目的基因。 四、化学合成 已知基因或蛋白质全长序列,合成短的寡核苷酸片断,拼接为长的DNA片断,再用连接酶连接成完整基因。 2.3 基因表达 基因表达:结构基因在生物体中的转录、翻译及所有的加工过程。 一、宿主细胞的选择 首要条件:能够生产出有活性的目的产物。 其他条件:容易获得较高浓度的细胞;
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