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生物必修一实验知识点
检测生物组织中的糖类、蛋白质、脂肪
①实验原理:
糖类中的还原糖(所有的单糖、绝大多数二糖(除蔗糖))与斐林试剂发生作用生成砖红色沉淀。{化学选修五已讲原理可自行了解}
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色(或被苏丹Ⅳ染液染成红色)。
淀粉遇碘变蓝。
蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应。
②材料用具:
还原糖的检测:还原糖含量高、细胞颜色较浅或近于白色的材料。
脂肪的检测:富含脂肪的材料。
蛋白质的检测:富含蛋白质的材料。
③试剂:
斐林试剂:甲液:质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液,乙液:质量浓度为0.05g/ml的硫酸铜溶液。
双缩脲试剂:A液:质量浓度为0.1g/ml的氢氧化钠溶液,B液:质量浓度为0.01g/ml的硫酸铜溶液。
体积分数为50%的酒精溶液
碘液、苏丹Ⅲ/Ⅳ染液
④检测方法步骤:
还原糖的检测:甲乙液等量混合均匀、现配现用;50-56℃水浴加热。
脂肪的检测:从花生子叶的横断面上切下薄片,先染色(Ⅲ 3min / Ⅳ 1min),再用酒精洗去浮色,用低倍镜找到物像、用高倍镜观察。
蛋白质的检测:先加A液1ml,再加B液4滴。
⑤现象:
还原糖:溶液先变蓝(斐林试剂颜色),再变棕(红蓝混合),最后砖红色沉淀。
蛋白质:溶液呈紫色。
脂肪:Ⅲ:橘黄色的脂肪颗粒 / Ⅳ:红色的脂肪颗粒
观察DNA和RNA在细胞中的分布
①实验原理:
{教材原话感觉都比较重点——}DNA主要分布在细胞核内,RNA大部分存在于细胞质中。甲基绿和吡罗红两种染色剂对DNA和RNA的亲和力不同,甲基绿使DNA呈现绿色,吡罗红使RNA呈现红色。甲基绿吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和RNA在细胞中的分布。
②材料用具:
质量分数为0.9%的氯化钠溶液,质量分数为8%的盐酸,吡罗红甲基绿染色剂{虽然书上说了一大堆成分以及配制方法,但凭我多年的做题经验来看没考过}
③方法步骤:
制片:1、在纯净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的氯化钠溶液。(维持细胞形态){基本上生理盐水都是这个作用}
2、涂抹细胞
3、烘干
水解:(考点):盐酸的作用:改变细胞膜的通透性,加速染色剂进入细胞;同时使染色质中的DNA与蛋白质分离,有利于DNA与染色剂结合。
冲洗:用蒸馏水的缓水冲洗(洗去盐酸并防止细胞被冲走)。
染色:(考点):吸水纸作用:洗去多余水分、染色剂
④观察:
用低倍镜:选择染色均匀、色泽较浅的区域,移至视野中央,将物像调节清晰。
用高倍镜:观察
⑤现象:
细胞核染成了绿色,细胞质染成了红色。
制备细胞膜{比较水的一个实验}
(考点):选用哺乳动物成熟的红细胞:没有细胞核和众多的细胞器。
现象是:进水的部分红细胞凹陷消失,细胞体积增大,很快细胞破裂,内容物流出。
一种分离细胞膜的方法:差速离心法
用高倍显微镜观察叶绿体和线粒体
实验原理:
叶绿体散布于细胞质中,呈绿色、扁平的椭球形或球形。
线粒体有短棒形、圆球形、线性、哑铃形等。健那绿{Janus green B}染液是将活细胞中线粒体染色的专一性染料,可以使活细胞中的线粒体呈现蓝绿色,而染色质接近无色。(线粒体可在健那绿染液中维持活性数小时。)
材料用具:
新鲜的藓类的叶(或菠菜叶、黑藻叶等){插一句这里看出黑藻是真核生物}
新配制的质量分数为1%(将0.5g健那绿溶解于50ml生理盐水中)
方法步骤:
观察叶绿体:载玻片中央滴清水→藓类小叶(或菠菜稍带叶肉的下表皮){被坑过无数遍-_-}→盖玻片→先用低倍后用高倍观察
观察线粒体:滴健那绿→涂口腔内侧细胞→盖玻片→高倍镜下观察
质壁分离{不得不说这个实验很重要,全国卷感觉每年都会有一道选择题(4)很坑人}
材料用具:
紫色的洋葱鳞片叶,质量浓度为0.3g/ml的蔗糖溶液,清水
方法步骤:
制作洋葱鳞片外表皮的临时装片→低倍镜下→从盖玻片的一侧滴入蔗糖溶液,另一侧用吸水纸吸引。!!(吸水纸的第二项(第一项是吸收多余液体排除实验干扰)作用:加快液体均匀覆盖)→观察→滴清水(吸水纸)→继续观察。
实验操作中应注意的问题
实验选材:要选取成熟的、液泡带有一定颜色的植物组织进行试验{其实黑藻叶片也可以(黑藻叶片细胞液泡呈无色,原生质层中有叶绿体存在使原生质层呈绿色)有利于实验观察,全国高考就很坑的考了。}
选取的蔗糖浓度要合适:过低,质壁分离的时间过长;过高,细胞由于失水过多会死亡。(原生质层的选择透过性是发生质壁分离和复原的内在前提,死亡的细胞既不会发生质壁分离,也不会发生质壁分离的复原。)
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