71基因工程和克隆技术.pptVIP

* 【注意点】限制酶所识别的序列，无论是6个碱基还是4个碱基，都可以找到一条中心轴线（如图），中轴线两侧的双链DNA上的碱基是反向对称重复排列的。 1.限制性核酸内切酶（限制酶） 2.DNA连接酶 ——E·coliDNA连接酶、T4DNA连接酶 【对位训练】限制酶在DNA的任何部位都能将DNA切开吗？以下是四种不同限制酶切割形成的DNA片段： 【思考】（2）（7）和（3）（6）可以交换连接吗？ 可以接，但失去识别位 点，接后不能再切开。 【纠错】 某土壤农杆菌中的Ti质粒结构示意图（内含T-DNA片段） 3.载体（分子运输车） 此外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 4.基因工程的基本操作程序 直接分离 较小 DNA合成仪 RNA 逆转录酶 PCR 基因组文库；部分基因文库（如cDNA文库） ——PCR技术扩增 前提是：要有已知目的基因的核苷酸序列（以便根据这一序列合成引物） （2）基因表达载体的构建——基因工程的核心 ①目的： 使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。 ②基因表达载体的模式图： 农杆菌转化法、基因 枪法、花粉管通道法 显微注射 技术 感受态细胞法 (用Ca2＋处理) 受精卵、体细胞 受精卵 原核细胞 【思考】若想将一个抗