农药残留快速检测.docVIP

PAGE 3 农药残留快速检测新技术的研究进展 摘要：农药残留的快速检测方法对食品安全、环境保护具有重要意义。本文综述了农产品中农药残留检测的各种检测新技术，对近年来出现的一些新技术和新动态作了简要介绍，总结了农药残留检测技术的发展方向。 关键词：农药残留;检测技术;酶抑制;免疫分析;生物传感器 引言 农药在提高农作物产量和保证人类食物供给方面贡献巨大，但由于农药的过量使用和滥用，食品中的农药残留对人类健康造成的负面影响越来越明显，人类食入被农药污染的蔬菜食品后，残留在其中的农药会在人体内累积或富集，当富集到一定浓度时，将造成人体急性或慢性中毒。因此，发展快速、可靠、灵敏的食品蔬菜农药残留分析方法迫在眉睫。 农药残留分析是一项对复杂混合物中痕量组分的分析技术，它要求精细的微量操作手段，灵敏度高，特异性强。由于各类蔬菜食品样品组成成分复杂，而且不同农药品种的理化性质存在较大差异，因而没有一种多组分残留分析方法能够覆盖所有的农药品种。而且农药残留的检测方法大多以仪器分析为主，采用高效液相色谱法、气相色谱法、薄层色谱法、气质联用、液质联用等。针对传统样品前处理存在的单个样品提取、净化时间较长，有毒溶剂消耗量大等问题，美国农业部农业研究服务中心于 2002 年首次公开发表一种用于农药多残留物检测的快速(Quick)、简便(Easy)、廉价(Cheap)、高效(Effective)、耐用(Rugged)、安全(Safe)(QuEChERS)法[1]。随后这种农药多残留物快速检测技术不断得到发展和完善[2-3]，并在蔬菜、水果等食品中农药残留快速检测得到广泛应用，所用检测设备，除了 GC-MS，还包括 LC-MS、UPLC-MS/MS 等。鉴于常规检测所需仪器设备昂贵且庞大、笨重，需要熟练专业技术人员操作，只能在实验室内进行抽样检测，难以满足样品现场快速检测的要求，各国科技工作者还应用新原理、新技术试图研究开发出一系列特异性强、灵敏度高、方便快捷、准确安全、简单廉价的快速检测新方法。 由于农药品种多、化学结构和性质各异、待测组分复杂，高效、低毒、低残留农药品种不断涌现，在农产品中残留量很低，直接测定非常困难。为此需对样品前处理技术、分析检测技术、快速检测技术进行改进、开发和研究。 农药残留快速检测技术 近年来，一大批农药残留快速分析方法涌现出来，如酶抑制法、免疫分析法、生物传感器技术、生物活体测定技术、分子印迹技术等。 2.1 酶抑制法 酶抑制法是利用有机磷及氨基甲酸酯类农药可特异性地抑制昆虫中枢和周围神经系统中乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性，造成神经传导介质乙酰胆碱的积累，影响正常传导，使昆虫中毒致死这一毒理学原理，将AChE 与样品反应，如果样品中没有农药残留或者残留量极少，AChE 的活性就不被抑制，反之，如果农药残留量比较高，AChE 的活性就会被农药所抑制。在酶反应试验中加入底物和显色剂观察颜色的变化或测定某种特定化合物反应的物理化学信号的变化，可判断是否存在有机磷或氨基甲酸酯类农药残留。目前，依据酶抑制法原理设计的农药残留检测方法主要有速测卡法（纸片法）、比色法（分光光度法）和胆碱酯酶生物传感器。 经过多年的酶抑制法研究开发和实践应用，中国先后颁布了2个国家标准和1个农业部行业标准，其中《GB/T5009.199—2003蔬菜中有机磷和氨基甲酸酯类农药残留量的快速检测》[4]提供速测卡法（纸片法）和比色法（分光光度法）2种快速检测方法，《GB/T18630—2002蔬菜中有机磷及氨基甲酸酯农药残留量的简易检验方法--酶抑制法[5]和《NY/T 448—2001 蔬菜上有机磷和氨基甲酸酯类农药残留毒快速检测方法》[6]均为比色法（分光光度法）。 2.2 免疫分析法 免疫分析法是利用抗原与抗体特异性结合反应检测各种物质（药物、激素、蛋白质、微生物等）的分析方法。抗原是能够引起免疫反应的分子，它是形成特异性免疫反应的必备条件。一个完整的抗原应包括 2 个基本性质：一是免疫原性；二是反应原性（又称抗原性或免疫反应性）。具备这 2 种性质为完全抗原，仅具有反应原性的物质称为半抗原。农药是典型的半抗原，只有反应原性而无免疫原性，不能诱导抗体产生，只有将它们与大分子蛋白质载体结合，才能刺激机体免疫系统产生抗体。抗原和抗体的制备是免疫分析的关键和基础的步骤。制备抗原时，如果农药分子自身带有供偶联的活性官能团（如氨基、羧基等），则可将农药分子直接与蛋白质载体进行偶联反应，否则就必须对农药分子进行衍生化，接上供偶联反应的活性官能团以合成人工抗原。有许多因素直接影响到能否制备出高质量的人工抗原，如选择合适的中间体、活性官能团引入位点的选择、半抗原产物的分离、间隔臂的长短、半抗原与载体分子的偶联比等[7]。抗体制备主要有 3 种途径：动物免