医用材料生物学基础－蔡伟第五章蛋白质材料表面相互的作用.pptVIP

蛋白质-材料表面相互作用 哈尔滨工业大学 材料物理与化学系 蛋白质-材料表面相互作用 蛋白质和材料的表面性能 蛋白质吸附与脱附 蛋白质构象的变化 多元溶液中的相互作用 蛋白质在材料表面的行为对于确定组织—植入物界面的性质起着非常重要的作用 表面吸附的蛋白质影响凝血、补体激活、细菌及细胞黏附 表面吸附的蛋白质也影响材料的表面性能与降解性 介绍蛋白质吸附的基本原理以及蛋白质和材料表面性质对固体表面的蛋白质行为的影响 一、蛋白质和材料的表面性能 影响材料表面活性的蛋白质性能与蛋白质的一级结构有关，即氨基酸的序列影响蛋白质-材料表面的相互作用 较大的分子易于与材料表面发生相互作用，因为它们可以有更多的位点与材料表面接触 例如白蛋白分子(67kDa)与氧化硅底物形成77个接触点，而每个纤维蛋白原(340kDa)分子则形成703个接触点 然而，尺寸并不是决定性的，球蛋白(65kDa)较其尺寸大得多的纤维蛋白原显示出更大的表面活性。 蛋白质电荷的影响 带电荷的氨基酸具有亲水性，通常位于蛋白质的外面，并易于与表面发生作用 这种电荷及其在蛋白质表面分布能够在很大程度上影响蛋白质的吸附 然而类似于尺寸的影响，电荷也不是惟一的决定因素 有趣的是蛋白质常在近等电位点表现出很大的活性(蛋白质分子显示出零净电荷时介质的pH计为pI)。 与蛋白质伸展有关的性能也会影响其在材料表面的吸附 蛋白质的伸展倾向于暴露更多与材料表面接触的位点 增加伸展的程度和速率都可导致更大的表面活性 蛋白质结构稳定性的影响 稳定性差的蛋白质或分子间交联较少的蛋白质倾向于伸展更多或更快,表面活性大 例如，血红蛋白中的谷氨酸被疏水的缬氨酸替代使S血红蛋白稳定性降低，不稳定的蛋白质因而溶解较少，导致纤维性析出而使红血细胞破坏。 蛋白质的双歧性分子性质及其氨基酸的极性、非极性、荷电性也对材料的表面活性有影响 亲水的、极性的和荷电的氨基酸位于分子外部 而疏水的残基在分子内部并不是绝对的，疏水的氨基酸也可位于蛋白质分子外部以与表面进行相互作用 另外，蛋白质的伸展可暴露疏水区域而与表面发生相互作用。 几何因数 底物的表面具有较多的形貌特征，可在与蛋白质的相互作用时暴露更多的表面区域 例如与平整的表面相比，有沟槽和坑的表面具有更大的表面积，其他的表面特征如加工痕迹可为与蛋白质的相互作用提供额外位置 化学成分 表面化学成分将决定何种功能基团适合于与生物分子相互作用 金属生物材料氧化的(钝化的)表面暴露金属离子与氧离子。类似地，陶瓷和某些玻璃表面包含金属离子和非金属离子 不同的功能基团，如氨基、羧基、羰基和原子团均可存在于聚合物生物材料表面 生物分子(或甚至分子的部分区域)对不同表面有不同亲和性取决于暴露何种基团。例如，疏水表面倾向于结合更多蛋白质而使结合更牢固。 微观组织结构 在微观尺度上，生物材料表面可以是不均匀的 生物材料表面可存在不同功能性的微畴，这些微畴可以与生物分子进行不同的作用 例如，许多金属生物材料至少有两相，如Ti-6A1-4V中的α相和β相，不仅不同的相与生物分子作用的行为可以不同，而且晶界和晶内与生物分子的作用行为也不同 对聚合物而言，大分子链的折叠引起的分聚提供了不同的微畴结构。蛋白质对这些畴有不同的亲和性取决于不同畴内存在不同的化学物质。 二、吸附与脱附 吸附是分子黏附到固体表面的过程，蛋白质-表面相互作用导致局部蛋白质的高浓度，可较均匀溶液高1000倍 这种蛋白质的聚集，尤其是特定的蛋白质在材料表面的聚集，在组织-植入体界面相互作用中起着决定性的作用。 除上面所述材料的表面性能和蛋白质性能之外，吸附也取决于分子与底物作用的效率 分子被吸附到表面可由4种传输机理中的一种或多种起作用。①扩散；②热对流；③流动；④互传输，如对流和扩散的相结合 浓度、速度和分子尺寸对决定到达材料表面的蛋白质分子是重要的 以考虑扩散的影响为例，简单的扩散可由以下公式描述： 上式表示高的体浓度和／或高的扩散系数(与分子尺寸成反比)导致到达材料表面的分子数量大 在对流也存在的情况下，导致对流扩散，这取决于界面的几何状态，数学处理变得复杂 蛋白质存在于材料表面，蛋白质分子可以分子间力的方式与底物发生相互作用，如离子键、疏水反应以及电荷传递反应 氢键在蛋白质-表面相互作用中不起主要作用 由于水易形成氢键，它与表面形成氢键就像蛋白质分子中的氨基酸与材料表面形成氢键一样容易 分子间力对蛋白质-表面相互作用的控制取决于特殊的蛋白质和表面 即使对于含单一蛋白质的溶液，蛋白质吸附层也似乎是不均匀的 当分子吸附于清洁表面时，它们与底物的作用有少量限制，每一个分子可与表面形成许多种接触 由于表面被占，适合于吸附随后的蛋白质的表面较少。继而分子可能以不同的取向结合到材料表面，即使是