工业微生物育种变剂.pptVIP

3.2 基因定点诱变 随着基因工程技术的发展，点突变技术在蛋白质工程中正得到广泛应用，特定寡核苷酸在突变技术中起着介导作用，使基因成为一种新的分子水平生物诱变剂。 寡核苷酸介导的定点诱变 3.3 生物诱变剂的主要诱变方式 1. 转导诱发突变 概念：经完全或部分缺馅噬菌体的媒介，将供体菌的小片段DNA携带至受体菌中，经配对、双交换后整合至供体菌内而获新的遗传性状之现象。 烈性噬菌体：随机转导，宿主细菌的基因型发生改变； 温和噬菌体：特定转导，使供体菌和受体菌都产生基因突变。 3.3 生物诱变剂的主要诱变方式 2. 转化诱发突变 供体菌：由细胞自溶等释 放 DNA片段； 受体菌：直接吸附并吸收 供体菌DNA片段； 在体内：经配对、交换与整 合成为自体基因组 的部分，再经复制 形成一个转化子. 感受态：转化中受体细胞最 易接纳外源DNA片 段的一种生理状态。 3.3 生物诱变剂的主要诱变方式 1. 转导诱发突变 烈性噬菌体：随机转导，使宿主细菌的基因型发生改变； 温和噬菌体：特定转导，也能使供体细菌和受体细菌都产生基因突变。 2. 转化诱发突变 3. 转座诱发突变 转座因子是在染色体组中或染色体组间不断改变自身位置的一段DNA序列 3.2 基因定点诱变 PCR定点诱变 课堂讨论 诱变剂在微生物育种中的作用和地位如何？ 诱变剂都有哪些效应？ 紫外线引起的胸腺嘧啶二聚体对微生物有何影响？哪些修复系统可对此进行修复，其结果如何？ 试述各种诱变剂的作用机制。 思考题 1 四种常用的物理诱变剂的诱变机制和生物学效应是什么？ 2 紫外线照射剂量的表示方法有哪些？ 3 简述紫外线诱变的过程。 4 哪些因素会影响化学诱变剂的诱变效应？ 5 如何用营养缺陷型回复突变测定法定性定量地测定某种化学物质的诱变作用？ 今日话题 太空育种 太空育种即航天育种，也称空间诱变育种，是将作物种子或诱变材料搭乘返回式卫星或高空气球送到太空，利用太空特殊的环境诱变作用，使种子产生变异，再返回地面培育作物新品种的育种新技术。 射线在穿过物质时，使该物质的分子或原子中的内层电子提高能级，但并不得到或丢失电子，因此不产生离子，故称为非电离辐射。一些高能射线在照射并穿过物质的过程中，能把该物质分子或原子上的电子击中而产生正离子，故称电离辐射。产生的正离子数量随着射线发射的能量增高而增加。 如X射线、γ射线和快中子等。 快中子有点特别。它本身是不带电荷的粒子，不直接产生电离，但是它可使吸收中子物质的原子核被撞击出质子。 * erg尔格 * γ射线是由放射性同位素CO60和CS137产生的 * 第二节 化学诱变剂 5.2.1 化学诱变剂的一般特点 5.2.2 化学诱变剂的类型: 碱基类似物 烷化剂 脱氨剂 移码诱变剂 羟化剂 金属盐类 其他化学诱变剂 2.1 化学诱变剂的一般特点 化学诱变剂往往具有专一性，对基因的某部位发生作用，对其余部位则无影响。 化学诱变剂的剂量主要决定于其浓度和处理时间。 绝大多数化学诱变剂都具有毒性。 定义：一类能对DNA起作用，改变DNA结构，并引起遗传变异的化学物质。 在DNA复制过程中取代正常碱基，整合进DNA分子 它们产生异构体的频率高，出现碱基错配的概率也高 碱基类似物是如何提高突变频率的? 2.2 碱基类似物 2.2 碱基类似物 1. 碱基类似物的诱变机制 以5－溴尿嘧啶(5-BU)为例 碱基类似物：是指其分子结构同DNA分子中的碱基非常类似，因此能取代碱基掺入到DNA分子中的一类化合物。 主要诱变剂：5-溴尿嘧啶（5-BU） /T 2-氨基嘌呤（2-AP） /A * G ≡ C G ≡ BUe G ≡ C G ≡ BUe G ≡ C A=T A=BUk A:T A: BUk A:T G ≡ BUe A:T G ≡C G ≡ BUe G ≡ C→A=T 5-BU掺入错误 A: T → G ≡ C 从上可知，由于5-BU分子结构上的5位Br原子的存在，改变了电荷的分布，影响酮式和烯醇式的平衡。 2.2 碱基类似物 2. 碱基类似物的诱变处理方法(以5-BU为例) (1) 单独处理 (2) 与辐射线复合处理 斜面细菌 液体培养 至对数期 饥饿培养 8-10h 琼脂平板涂布培养 移接 去培养液 加生理盐水 加5-BU 25-40μg/ml 据报道，如果菌体先用5