常规石蜡制片HE染色技术.pptVIP

光镜下观察组织标本需克服的几个问题 如何保持组织标本取材前的形态？ 如何制备薄组织片，允许光的通过而便于 观察？ 如何使不同组织结构具有不同的光折射 率，便于对标本进行结构的仔细辨别？ 用量 1. 生理盐水 大鼠需用80-100ml、兔150-200ml、 猫200-250ml、猴300-500ml、 狗800-1000ml 2. 固定液 动物血液量的2倍 动物体重（g）×7%×20（ml） 常用混合固定液 1．酒精-甲醛液（A-F 液） 95%或无水酒精（A） 90ml 37%~40%甲醛液（F） 10ml 2．Carnoy液 冰醋酸 10ml 氯仿 30ml 无水酒精 60ml 3．Bouin 液 饱和苦味酸水溶液 75ml 甲醛液（37%~40%） 25ml 冰醋酸 5ml （三）分化液 去除过度染色或不需要着色的组织成份上颜色的过程，叫分色 　　　所使用的试剂配制的液体称为分化液 　　　而苏木素的分化过程中，使酸性条件转变成碱性条件，苏木素染色的结构也由红色转变成蓝色，所以这一过程又称蓝化 三、石蜡切片染色中脱蜡、水洗、 脱水和透明等的作用 石蜡 去石蜡 去二甲苯 水化 颜色 二甲苯 酒精 水 染液 透明 脱水 水分 二甲苯 酒精 苏木素（或苏木精）是一种天然的染料，易溶于酒精而微溶于水，是较好的细胞核碱性染料，并可将细胞中不同的结构分化出各种不同的颜色；苏木素分子须经氧化形成苏木红分子，才具有真正的染色能力；同时须配合适当的媒染剂以增强它对组织的亲和力，达到染色目的 伊红（或曙红）是人工合成的煤焦油类染料，红色粉末状，易溶于水或酒精，为酸性细胞胞质染料；有伊红Y、B、BN等，常用的是伊红Y。伊红常作为苏木素的对比染色染料，染色中常需加助染剂和分化剂，使染色效果更加好 二、苏木素-伊红染液的配制 （一）苏木素染液 一种是将氧化剂（如氧化汞、高锰酸钾、过氧化氢或碘酸钠等）与媒染剂（硫酸铝铵、硫酸铝钾或硫酸铝铁等）直接混合于苏木素中配成溶液 另一种是先用媒染剂媒染组织结构，再用氧化的苏木素（自然氧化）染色，最后用媒染剂分色 Harris苏木素染液 苏木素 1g 无水酒精 10ml 硫酸铝钾（或硫酸铝铵） 20g 蒸馏水 200ml 氧化汞 0.5g Mayer苏木素液 苏木素 1g 蒸馏水 1000ml 碘酸钠