正常细胞与肿瘤细胞常规核型的标本制备.pptVIP

【实验目的】 1. 掌握微量全血培养及正常细胞和肿瘤细胞常规核型的标本制备技术。 2. 了解正常及肿瘤细胞核型的一般特征。 正常细胞与肿瘤细胞常规核型的标本制备 Experiment 26 【实验材料】 一、材料和标本：健康人的外周血、培养的HeLa细胞和HL-60细胞。 二、器材和仪器：超净台、煤气灯、乳胶管、火柴、镊子、废液缸、离心机、水浴箱、定时钟、天平、离心管(10m1)、乳头吸管、显微镜、载玻片、平皿等。无菌器材有培养瓶、培养皿、注射器(5ml、lml)、注射针头(7号、 号)、刻度移液管(5ml、2ml、lml)、吸管等。 三、试剂：1640培养液、500单位／ml的肝素溶液、10μg／ml的秋水仙素溶液、0.25％胰蛋白酶一0.02％EDTA混合消化液,O．5mg／ml的PHA溶液、0.075mol／L的KCl溶液，甲醇、冰醋酸、Giemsa原液、磷酸缓冲液(pH6.8)、生理盐水等。 【实验内容】 一、微量全血培养 1．打开超净台紫外灯20～30分钟。洗手、换洁净白大衣后进入操作室。启动超净台，点燃煤气灯。用75％酒精棉球擦洗手、各种试剂瓶及操作台面，然后将培养液及肝素、秋水仙素、PHA等所需溶液移入超净台。 2．在超净台内将每个培养瓶装入5ml培养液及0.2ml PHA溶液，封好备