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- 2019-10-09 发布于广东
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逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction ,RT-PCR)
的原理是:提取组织或细胞中的总 RNA ,以其中的mRNA 作为模板,采用 Oligo (dT )
或随机引物利用逆转录酶反转录成 cDNA。再以 cDNA 为模板进行 PCR 扩增,而获得目的
基因或检测基因表达。RT-PCR 使 RNA 检测的灵敏性提高了几个数量级,使一些极为微量
RNA 样品分析成为可能。该技术主要用于:分析基因的转录产物、获取目的基因、合成 cDNA
探针、构建 RNA 高效转录系统。
详细
实验方法
逆转录-聚合酶链反应实验方法
实验材料
组织或细胞样品
试剂、试剂盒
RNA 提取试剂
dNTP 混合物
Taq DNA 聚合酶
第一链 cDNA 合成试剂盒
仪器、耗材
离心管
离心机
水浴锅
PCR 管
电泳仪
凝胶图像分析系统
逆转录-聚合酶链反应 (Reverse Transcription-Polyme
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