DNA与蛋白质技术.pptVIP

高 频 考 点 1.蛋白质的提取和分离。 2.PCR技术的基本操作和应用。 实 验 要 求 1.蛋白质提取的原理和方法。 2.PCR技术的操作及原理。 1．方法及原理 (1)方法：电泳法。 (2)原理：①各种蛋白质分子带电性质的差异； ②分子本身大小、形状的不同。 2．实验操作程序 (1)点样：用微量加样器取新制血清，小心加到电泳样品槽的胶面上。 (2)电泳：打开并调节稳压稳流电泳仪进行电泳。 (3)染色：用质量分数为0.05%的考马斯亮蓝R250染色液对凝胶进行染色。 (4)脱色：用体积分数为7%的醋酸溶液脱色。 (5)制干胶板：保存液浸泡凝胶板后，放在两层透气玻璃纸中间自然干燥。 特别提醒：相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时，相对分子质量较小的蛋白质容易进入凝胶内部的通道，而相对分子质量较大的蛋白质只能在凝胶外部移动，移动速度快，因此蛋白质分子彼此分离。 1.下面是凝胶色谱法分离血红蛋白时样品的加入(图Ⅰ)和洗脱(图Ⅱ)示意图，请据图回答下列问题。 (1)在加样示意图中，正确的加样顺序是________。 (2)用吸管加样时，应注意正确操作，分别是①________、 ②________、③________。 (3)等样品________时，才加入缓冲液。 (4)待________接近色谱柱底端时，用试管收集流出液每________mL收集一管，连续收集。 解析