多肽与蛋白质类药物-公开课件（讲义）.pptVIP

②工艺过程 提取 匀浆、离心 加热去杂蛋白 提取液80℃加热15min， 沉淀 -10℃丙酮， 超滤 取分子量在15000以下的超滤液。 脱盐、干燥 超滤液经Sephadex G-25脱盐后，冷冻干燥得胸腺素。 （3）检验方法：活力测定：E-玫瑰花结升高百分数不得低于10％；分子量15000以下。 （4）作用与用途：为免疫调节剂。 2、胸腺肽（Thymus peptides） （1）结构和性质：胸腺肽中主要是分子量9600和7000左右的两类蛋白质或肽类，氨基酸组成达15种，必需氨基酸含量高，还含有RNA 0.2～0.3mg／mg，DNA0.12～0.18mg／mg。对热较稳定，加温80℃生物活性不降低。经蛋白水解酶作用，生物活性消失。 （2）生产工艺： ?①工艺路线 ②工艺过程 超滤、提纯、分装、冻干 加3％甘露醇作赋形剂。 （3）检验方法：活力测定同胸腺素。分子量10000以下。 （4）作用与用途：胸腺肽可调节细胞免疫功能，有较好的抗衰老和抗病毒作用。无过敏反应和不良的副作用。 （二）促皮质素（Adrenocorticotropic hormone，ACTH） 1．结构和性质: 垂体包括腺垂体和神经垂体，可分泌多种激素。 促皮质素是从垂体前叶提取出来的一种多肽激素。易溶于水，等电点为6.6。在干燥和酸性溶液中较稳定，虽经100℃加热，但活力不减；在碱性溶液中容易失活。能溶解于70%的丙酮或70％的乙醇中。 ACTH为39个氨基酸组成的直链多肽，种属差异仅仅表现在第25～33位上。ACTH的24肽即1～24位的片段（ACTH 1～24）具有全部活性。这是因为ACTH的第24位氨基酸之后的部分，不参与同受体的作用，它仅维持整个多肽结构的稳定性。 ACTH可被胃蛋白酶部分水解，但仍有活力，ACTH在溶液中存在着高度的 α－螺旋。 2、生产工艺 （1）工艺路线： （2）工艺过程： 提取 分离 精制 CMC（羧甲基纤维素 弱酸） 717处理色、热原、负离子 梯度洗脱。 732、717除盐（动态吸附） 3、检验方法 ACTH粗品每1mg相当于1U以上，用小白鼠胸腺萎缩法测定；ACTH精品每1mg45U以上，用去垂体大白鼠的肾上腺维生素C降低法测定。 4、作用与用途 ACTH能维持肾上腺皮质的正常功能，促进皮质激素的合成和分泌。 （三）降钙素（Calcitonin， CT） 1、结构和性质 降钙素是一种调节血钙浓度的多肽激素，由甲状腺内的滤泡旁细胞（C细胞）分泌。是由32个氨基酸残基组成的单链多肽，降钙素肽链的脯氨酸端与生物活性有密切的关系，去掉脯氨酸则失活。 降钙素分子量约3500，溶于水和碱性溶液，不溶于丙酮、乙醇、氯仿、乙醚、苯、异丙醇及四氯化碳等，难溶于有机酸。水溶液中2~7℃ 可保存7天。 降钙素在人及哺乳动物体内，主要存在于甲状腺、甲状旁腺、胸腺和肾上腺等组织中，鱼类则在鲑、鳗、鳟等的终鳃体里含量较多。各种不同动物来源的降钙素，氨基酸排列顺序有些差异。 2、生产工艺 制造降钙素的原料主要有猪甲状腺和鲑、鳗的心脏或心包膜。用化学合成和基因工程技术制备降钙素已获成功。 （1）工艺路线： 提取、分离、精制 制丙酮粉、离心与过滤（工业考虑）、离子洗脱分离。 3、检验方法 生物活性测定方法：样品用经过0.1mol／L醋酸钠溶液稀释过的0.1％白蛋白溶液溶解，取0.2ml样品按倍比稀释法配制，选用雄性大白鼠，静脉注射1h收集血液。血样品的血清钙值采用原子吸收光谱法测定，对照采用MRC标准品，该标准品是从猪甲状腺中提取的。将标准品稀释至所需要的稀释度2.5、5、10和20MRCmU／0.2ml，然后用同样方法给大鼠注射，1小时后测定血清钙值。根据标准品测定样品的生物活性。 4、作用与用途 降钙素的主要功能是降低血钙。由于降钙素有抑制破骨细胞活力的作用，所以能抑制骨盐的溶解吸收，从而阻止钙从骨中释出。 血钙高可促使降钙素分泌增加，使血钙降低，血钙低时可促使甲状旁腺素分泌增加而使血钙升高，两者互相制约，共同维持血钙平衡。 第三节 蛋白质类药物 ?一、概述 现正从微生物和动物细胞的表达转向基因动植物发展。鉴于一些蛋白质和多肽生化药物有一定的抗原性、容易失活、在体内的半衰期短、用药途经受限等难以克服的缺点，对一些蛋白质生化药物进行结构修饰、应用计算机图像技术研究蛋白质与受体及药物的相互作用、发展蛋白质工程及设计相对简单的小分子来代替某些大分子蛋白质类药物，并且起到增强或增加选择性疗效的作用等，已成为前瞻性的重要任务之一。 主要蛋白质类药物有以下几类： 1、蛋