原位探针半定量.docVIP

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  • 2019-10-18 发布于山东
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原位探针半定量 点膜前需准备的试剂和溶液: 1.(点膜前新鲜配制,RNA用) RNA 稀释缓冲液:DEPC·H2O : 20×SSC : 甲醛 = 5 : 3 : 2 2. 马来酸缓冲液:0.1M 马来酸,0.15M 氯化钠 500ml 配方: 马来酸 5.8 g NaCI 4.4 g 固体NaOH 3.5 g ddH2O 400 ml 1 N NaOH 调PH至7.5,定容,灭菌,室温保存。 3. 10×TNM-50 PartⅠ:1M Tris-HCI(PH 9.5), 1M NaCI 4. 1 M MgCI2 操作步骤: 1.用RNA 稀释缓冲液(1 ml)稀释对照(罗氏合成试剂盒Vial 5)和自己合成的探针 稀释倍数如下: ①对照 稀释倍数 管号 取自 探针量(ul) 稀释缓冲液(μl) 终浓度(ng/μl) 1:10 1# Vial5 2 18 10 1:100 2# 1# 5 45 1 1:1000 3# 2# 5 45 0.1 1:10000

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