第十五章生物技术与作物育种教程教案.pptVIP

第十五章 生物技术与作物育种;;;一、植物细胞和组织培养技术 （一）培养基及其组成 1、培养基的种类和特点 （1）MS培养基 （2）B5培养基 （3）White培养基 （4）N6培养基 （5）KM-8p培养基 （6）SH培养基 ;3、培养基的配置 (1)水和药品 水必须采用蒸馏水或无离子水，药品最好采用分析纯，至少是化学纯药品。 (2)母液的配置 为方便培养基的制备，现将培养基的各种成份分类配成浓缩的母液，正式配制时按规定用量稀释混合。 (3)制备培养基 混合各成分母液 熔化琼脂 (4)培养基的消毒 主要有高温高压灭菌和过滤灭菌两种方法。 ; 4、无菌操作方法 （1）消毒剂 ;（2）无菌操作 （3）无菌培养 二、细胞和组织培养与作物育种 （一）体细胞克隆变异及其育种利用 1、体细胞克隆变异的遗传基础 （1）染色体数目变异 （2）染色体结构变异 （3）点突变 2、突变体的筛选 ;3、在作物改良上应用 （1）抗病 （2）抗除草剂 （3）抗氨基酸或氨基酸类似物 （4）耐盐 （5）耐旱 ;（二）单倍体细胞培养及育种利用 1、单倍体细胞培养在遗传和育种中的应用价值 （1）后代的快速纯合 （2）提高选择效率 （3）排除杂种优势对后代选择干扰 （4）遗传研究的良好实验材料体系 （5）突变体的筛选; 母本 X 父本;2、离体培养条件下的小孢子发育 （1）营养细胞发育途径 （2）生殖细胞发育途径 （3）营养细胞和生殖细胞并进发育途径 （4）花粉均等发育途径 3、影响花药培养的因素 （1）供体植株的生长条件 （2）供体植株的年龄 （3）花粉发育时期 （4）花蕾和花药处理 （5）培养基 （6）培养条件 ;4、单倍体细胞培养与植物育种;三、植物原生质体培养和体细胞杂交;;2、影响原生质体分离因素 （1）材料来源 （2）渗透压 （3）酶 （4）分离培养基 （5）培养条件 （6）组织前处理 3、原生质体的收集、纯化和活力测定;;;第二节 转基因技术与作物育种;;;（2）我国转基因作物研究与利用概况;（二）转基因育种程序;;;B、根据连锁图谱克隆的基因;C、转座子标签法;D、差异显示法 在生物??体发育的不同阶段或是在不同的组织、空间进行有序表达的方式，叫做基因的差异表达。 差异显示PCR是指通过对来源特定组织类型的总mRNA进行PCR扩增、电泳，并找出待测组织和对照之间的特异扩增条带，该条代就有可能是全长或是部分特异表达的基因，利用这种方法进行基因克隆的方式就是差异显示法基因克隆。 现在又出现了限制性消减杂交（SSH）和RNA任意引物PCR（RAD-PCR）等多种方法。 ;;;;;;;二、转基因作物的遗传特点;;（二）、整合后的外源基因在植物体内的表现;(三)、外源基因在后代中的遗传规律;三、转基因作物品种的选育;（二）、转基因方法的确定及转基因植株的获得（三）、转基因作物品种的选育 纯系育种 回交育种 杂交育种 杂种品种 ;（四）转基因作物的生物安全性;;第三节、分子标记辅助选择育种;2、原理和遗传特性;基本步骤;;;（4）SSR标记 A、 SSR标记原理 根据微卫星DNA两端的单 拷贝序列设计一对特异引 物，利用PCR技术，扩增每个 位点的微卫星DNA序列，通过 电泳分析核心序列的长度多 态性。 ;基 本 步 骤;B、SSR标记的特点 （1）SSR标记为共显性标记，可鉴别出纯合子和杂合子。 （2）重复性高，稳定可靠。 （3）DNA用量少，对DNA的质量要求也不太高。 （4）使用SSR技术需要知道重复序列两翼的DNA序列。 ;二、重要农艺性状基因连锁标记的筛选技术;2、构建遗传图谱的主要环节： 根据遗传材料之间的多态性确定亲本组合，建立作图群体。 对群体中不同植株的标记进行基因性分析。 借助计算机程序构建连锁群 3、构建遗传图谱，首先要选择合适的亲本及分离群体，而且亲本之间的差异不宜过大，否则会降低所建图谱的准确度和适用性。 4、用于分子标记的遗传作图可分为两类： 暂时性分离群体，包括F2群体、BC等 永久性分离群体，包括重组自交系群体、加倍单倍体群体等 ;自花授粉作物作图群体的构建方法;;（二）、近等基因系的培育与重要农艺性状基因的标记 （三）、群体分离分析法与重要农艺性状基因的标记 （四）、数量性状基因的定位 ;三、作物MAS育种;供体;（二）、MAS育种方法 ; 受体亲本 × 供体亲本 (不含优质基因) (含优质基因); 受体亲本