甘露醇对拟南芥基因组DNA甲基化的影响_杜亚琼.pdfVIP

植物学报 Chinese Bulletin of Botany 2011, 46 (3): 285–292, doi: 10.3724/SP.J.1259.2011.00285 ·研究报告 · 甘露醇对拟南芥基因组DNA甲基化的影响 杜亚琼, 王子成* 河南大学生命科学学院植物种质资源与遗传工程实验室, 开封 475004 摘要 以拟南芥(Arabidopsis thaliana)为材料, 研究不同浓度甘露醇处理下拟南芥幼苗生长发育及其基因组DNA的甲基化 水平和变化模式。结果表明, 用50、100、150和200 mmol·L―1甘露醇处理拟南芥种子会对拟南芥幼苗的形态特征和生长态 势产生影响; 甲基化敏感扩增多态性(methylation-sensitive amplification polymorphism, MSAP)分析表明, 经50、100、150 和200 mmol·L―1甘露醇处理后, 基因组DNA 甲基化比率分别为17.75%、21.15% 、15.49%和46.10% 。甘露醇处理使拟南 芥发生基于DNA 甲基化水平和模式改变的表观遗传变异。与对照相比, 在50、100、150和200 mmol·L–1甘露醇处理下拟南 芥幼苗基因组DNA的甲基化和去甲基化比率分别为5.78%、15.48%、10.71%、33.73%及10.98%、5.36%、8.33%、7.69% 。 由此推测, 5- 甲基胞嘧啶百分含量随着甘露醇胁迫的增强而发生不同程度的变化。 关键词 拟南芥, DNA 甲基化, 甘露醇, MSAP 杜亚琼, 王子成 (2011). 甘露醇对拟南芥基因组DNA 甲基化的影响. 植物学报 46, 285–292. 甘露醇(mannitol)是一种植物组织相容性溶质, 甲基化水平的降低对植物的一些重要性状会产生极 对植物培养细胞无毒害, 在生理学研究中可被用作组 为重要的影响, 非生物胁迫能够造成全基因组和特定 织液吸收剂, 被认为是比PEG26000更好的水分胁迫 位点胞嘧啶甲基化水平的升高或降低(Lukens and 因子(赵宇玮等, 2005)。研究发现, 甘露醇预处理比低 Zhan, 2007) 。植物在应对环境胁迫时甲基化水平的 温预处理和对照能明显地提高大麦(Hordeum vulgare) 改变是动态的, 如铝(Choi and Sano, 2007)、重金属 花粉粒存活率和质量, 有利于进一步分裂形成胚状体 (Aina et al., 2004)和水分胁迫(Labra et al., 2002)也 和愈伤组织; 并能明显提高大麦花药培养愈伤组织诱 会造成全基因组和特定位点胞嘧啶甲基化水平的增 导率、绿苗分化率及绿苗产量(刘辉等, 2009)。甘露醇 加或降低(Zhao et al., 2010)。 高渗处理可促进根癌农杆菌对石斛兰(Dendrobium)的 目前, 有关甘露醇对植物基因组DNA 甲基化的 转化效率(冯莹和赖钟雄, 2009)。在进行植物组织培养 影响尚未见报道。为此, 本文以拟南芥(Arabidopsis 时, 添加一定浓度的甘露醇可以抑制植物的生长, 因 thaliana)为材料, 通过用不同浓度甘露醇处理拟南芥 而甘露醇被普遍用来保存种质资源, 保存时间为1–2 种子, 测定处理后植株的形态特征及生长态势, 并采 年。而Harding(1994)发现高渗透胁迫能够影响植物 用甲基化敏感扩增多态性(methylation-sensitive am- DNA 甲基化, 甘露醇处理可影响马铃薯(Solanum tu- plification polymorphism, MSAP)方法分析其对拟南 berosum)基因组DNA和rDNA的甲基化状态。 芥CCGG位点胞嘧啶甲基化水平和模式的变化造成 DNA 甲基化是表观遗传学研究的热点之一。在生