茶树2个MYB转录因子基因的克隆及表达分析.pdfVIP

茶树2个MYB转录因子基因的克隆及表达分析 马春雷 姚明哲 王新超 金基强 陈 亮 中国农业科学院茶叶研究所国家茶树改良中心 杭州310008 MYB类转录因子是一类包含一段保守的DNA结合结构域的基因家族，广泛地参与植物发育和植物次生 代谢的调节。根据前期芯片杂交和文库筛选得到的2个MYB转录因子的部分序列，采用RT-PCR和RACE技术分 离得到它们的全长基因：C3MYBI和C3MYB2，在GenBank的登录号分别为HQ660373和 HQ660374。序列分析表 明：CsMYBI基因全长1132bp，开放阅读框长879bp，编码292个氨基酸，推测的蛋白分子量约为32.9ku，理论等 电点为8.13:CsMYB2基因全长1020bp，其中开放阅读框长675bp，编码224个氨基酸，推测的蛋白分子量约为 25.4ku,理论等电点为9.05。2个基因编码的蛋白均具有明显的R2R3MYB结构域，且在R3结构域的下游都含有 1个相对保守的C1(LIXXGIDPXTHR)基序。同源性分析表明：茶树CsMYBI和CsMYB2编码的氨基酸序列与其他 植物的MYB类转录因子具有较高的相似性，其中CsMYBI编码的氨基酸序列与陆地棉MYBI的相似性为57％， CsMYB2编码的氨基酸序列与葡萄MYBC2的相似性为75％。利用荧光定量PCR技术检测2个转录因子基因在遮 荫处理条件下的表达规律，及其在茶树不同组织中的表达特性，结果表明：CsMYBI和CsMYB2在不同组织中均有 表达，但表达量具有明显区别，其中CsMYB2在叶片中的相对表达量是根中的100多倍；而遮荫处理能明显降低叶 片中的花青素含量，并提高CsMYBI的表达，但对转录因子CsMYB2的影响不大。 茶树；MYB转录因子；基因克隆；表达分析 S718.46;Q943.2 A 1001 -7488(2012)03-0031 -07 CloningandExpressionofTwoMYBTranscription FactorsinTeaPlant(Camelliasinensis) MaChunlei YaoMingzhe WangXinchao JinJiqiang ChenLiang 2011-07-04 2011-11-07 基金项目：“国家茶叶产业技术体系”项目(CARS-23)；国家自然科学基金项目31170624；浙江省自然科学基金项 目(Y3100291;Y3090041:Y3110260)。 万方数据 1 材料与方法 1.1材料 万方数据 反应在MJ-PTC220型 万方数据 3讨 论 万方数据 子作为MYB蛋白最大的一类，主要参与植物花青苷 的代谢调节(许志茹等，2008)。自Paz-Ares等 万方数据 @@1.房 栋，吕俊宏，郭旺珍，等.2008.一个新的棉花MYB类基因 (GhTF1)的克隆及染色体定位分析.作物学报，34(2)： 207-211. @@2.季鹏章，梁名志，宋维希，等.2010.茶树珍稀品种“紫娟”的叶片色素