酶蛋白的结构资料教程.pptVIP

第三章 酶蛋白的结构 ;这种改变导致血红蛋白表面电荷减少，在脱氧状态下溶解度下降，发生不正常聚集，形成镰刀状红细胞，严重时造成红细胞破裂。血红蛋白分子共有574个氨基酸残基组成，仅仅两个β亚基上各改变了一个氨基酸残基，生理功能就发生了如此大的变化，可见蛋白质的一级结构对功能的影响之大。 ;牛胰核糖核酸酶复性实验 8个Cys－SH形成4个二硫键的组合方式有7×5×3=105种，因而重新形成正确配对的概率仅1/105， ;第一节 蛋白质一级结构研究方法 ;1. 蛋白质的分离纯化和相对分子质??的测定 电泳单一带 SDS测分子量（质谱法） ;2.确定蛋白质分子中多肽链的数目 末端分析法 3. 拆分并分离蛋白质分子的多肽链 氧化法 氧化法的优点在于二硫键一旦拆开，不会重新形成连接，但在氧化过程中伴随着一些副反应，Met侧链被氧化生成亚砜，Trp侧链被破坏。 还原法 为了防止游离巯基重新氧化，还需加入烷化剂如碘乙酸，使巯基上发生取代反应而不会重新被氧化 ;4. 测定每条多肽链的氨基酸组成 蛋白质完全水解：要求完全水解且不破坏氨基酸 1）酸水解： 作水解程度时间图确定最佳时间 1-10mg蛋白样品 → 加HCl → 抽真空 → 封闭 → 烘箱 特点：a）Trp完全破坏，生成不溶性物质 b）? Ser、Thr、Tyr部分破坏，Ser破坏10-15%，Thr、