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- 2019-10-14 发布于湖北
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2、将目的基因导入动物细胞 ①方法:显微注射法 ②程序: 归纳: 基因工程的基本操作程序 获取目的基因 从基因文库 利用PCR 化学方法人工合成 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因 将目的基因导入受体细胞 农杆菌转化法、显微注射法 目的基因的检测与鉴定 检测:是否插入、转录、翻译 鉴定: 目的基因表达载体提纯 取卵(受精卵) 显微注射 受精卵 新性状动物 3、将目的基因导入微生物细胞 ①原核生物特点: 繁殖快、单细胞、遗传物质少 ②方法: 用Ca2+处理细胞 感受态细胞 表达载体与感受态细胞混合 感受态细胞吸收DNA分子 四、目的基因的检测与鉴定 导入过程完成后,全部受体细胞都能摄 入重组DNA分子吗? 真正能摄入重组DNA分子的受体细胞很少。 目的基因进入受体细胞后,是否都能稳定维持和表达? 不一定,需要检测 1、鉴定——分子水平的鉴定 转基因生 物的DNA 探针 15N 15N (1)检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了 目的基因 基因探针: 指用荧光或放射性同位素标记的DNA分子 方法—— DNA分子杂交技术 变性 变性 1、鉴定——分子水平的鉴定 变性 方法—— 分子杂交技术 (2)检测目的基因是否转录出了mRNA 探针 15N
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