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实验十六 ABO血型鉴定RH血型鉴定 实验目的 1、熟练掌握ABO血型鉴定方法。 2、熟悉RH血型鉴定的方法及结果判定。 实验器材、试剂 ［器材］毛细血管采血用具、离心机、试管、玻片 ［试剂］ 1、生理盐水 2、标准血清 3、抗D抗体 实验安排 两人一组互取标本，配制5%红细胞悬液 1、单号：ABO血型鉴定正定型：玻片法 2、双号：ABO血型鉴定正定型：试管法 3、每人进行Rh血型鉴定 提问 玻片法血型测定的方法及结果判读 实验操作 两人一组毛细血管采血 1、配制5%红细胞悬液： 末梢采血1滴+10滴生理盐水 2、ABO血型鉴定—正定型 玻片法： A B 各加一滴红细胞 抗B 抗A 转动玻片，15分钟后观察结果 实验操作 ABO血型鉴定—正定型 玻片法： A B 各加一滴红细胞 抗B 抗A 转动玻片，15分钟后观察结果 实验操作 3、ABO血型鉴定—正定型 试管法： A B 标记号 1滴抗B 1滴RBC 悬液 标记号 1滴抗A 1滴RBC悬液 1000转/min离心1分钟，观察凝集结果 实验操作 4、Rh血型鉴定: ----1滴红细胞悬液 1滴抗D---- 37℃水浴30分钟 Rh阳性 Rh阴性 结果报告 ABO血型的报告方式： ABO血型 型 Rh血型的报告方式： Rh血型：阴性 Rh血型：阳性 注意事项 要有及高的责任心，避免发生血型鉴定错误 对于工作人员1%的错误，病人就是100%的误诊！！ 作业 完成实验报告 P248 实验准备与安排 一：1、2、3 P252 实验准备与安排 一：1、2、3 报告今日血型测定结果 格式如下 ： 姓名： ABO血型： Rh血型： 检验者签字： 日期： 预习 交叉配血的操作方法 同型配血的结果判断 异型配血的结果判断 项目二 血型与输血 任务二 Rh血型鉴定 第四节 Rh血型 概念 一、Rh血型抗原 抗原性强弱次序为DECce Rh阳性：含D抗原 Rh阴性：不含D抗原 亚型中，以Du最有临床意义，易被误定为Rh阴性。 二、Rh血型抗体 免疫性抗体： 抗D抗体最强，其次是抗c和抗E。 IgG、免疫产生、小、可通过胎盘，温性抗体、需要抗人球蛋白等介质才能与相应红细胞凝集 三、Rh血型的遗传和命名 四、Rh血型鉴定 是否含有D抗原 因Rh抗体多为不完全抗体，所以多采用酶介质、抗人球蛋白等试验方法。 聚凝胺 低离子强度溶液 柠檬酸盐解聚液 （二）酶介质法 【原理】 酶（木瓜酶、菠萝酶等）可破坏红细胞表面带负电荷的唾液酸，降低红细胞表面负电荷，使红细胞之间排斥力减小，红细胞间距缩小，在不完全抗体的作用下发生凝集。 （三）抗人球蛋白法 【原理】： 不完全IgG类抗D抗体,使红细胞致敏,加入经一定稀释的抗人球蛋白血清后,将致敏红细胞连接，发生肉眼可见的凝集。 实践操作 用PH6.8-7.2的生理盐水配制2-3%的红细胞悬液，洗涤1次 加入抗D抗体与红细胞悬液各一滴于玻璃试管中 混合并在室温下（18—25℃）15分钟. 离心15秒钟,观察结果. 出现凝集为阳性 不出现凝集为阴性,对于阴性结果应再做的DⅥ和弱D型的测试 注：该抗D抗体为 IgG/IgM单克隆鉴定抗体混合型，其中IgMAnti-D可直接凝结D阳性红细胞，除了D4型和弱D(亚D)的一部分。IgGAnti-D通过间接的抗蛋白测试方法凝结D4和低浓度的弱D(亚D). 五、Rh血型的临床意义 （一）Rh血型与输血 （二）Rh血型与新生儿溶血病 Rh阴性 Rh+ 抗D 抗D 第二次 复习思考题 1、Rh血型中抗原性最强、临床意义又最大的抗原是： 2、因为Rh抗体多为 抗体，所以常采用 、 、 等方法。 3、Rh血型不合引起的新生儿溶血病的原因：Rh 的母亲孕育了Rh 胎儿后，胎儿红细胞可通过胎盘屏障进入母体的血循环中，刺激母体产生