氨基酸分析-2-27-公开课件（精选）.pptVIP

* ?两步法是先将羧基用短碳链脂肪醇酯化， 然后再用各种酸酐将N-（O、S）基团乙酰 化。 ?一步法是用烃基氯甲酰酯在水、醇类和吡 啶介质中将氨基酸一步衍生化生成烃基碳 氧酰烃基酯。 衍生化方法 * ?毛细管电泳具有微量、灵敏和柱效高的 特点，适合于氨基酸手性分离和复杂样 品中的氨基酸分析。 ?用于氨基酸分析的毛细管电泳主要采用 两种分离模式：毛细管区带电泳和胶束电动毛细管电泳。 ?检测方式主要有紫外法和荧光法。 毛细管电泳法 * ?毛细管电泳法可以进行柱前、柱内和柱后衍生化。 ?柱内衍生化要求反应速度快，一般采用串联或 “夹心饼”两种形式，具有试剂和样品用量少的 优点。 ?柱后衍生化可以避免柱前或柱内衍生化时其他 化合物对衍生反应的干扰，缺点是柱后反应装 置体积大，会引起色谱峰变宽而降低分离效果。 毛细管电泳法 * 氨基酸选择性反应的分析方法 1、显色分析法 2、荧光法 3、微生物方法 4、酶分析法 * 显色分析法 ?有几种显色试剂只有当干扰物预先除去后才有定量分析的价值。 ?在有些情况下可以通过改变试剂的组成或反应条件以便进行某一种氨基酸的选择性测定。 * 荧光法 ?色氨酸、酪氨酸、苯丙氨酸等在紫外光照 射下会产生荧光，其它氨基酸与某些有机 试剂反应之后其产物才会产生荧光。 ?相对于显色法，荧光分析法的选择性和灵