141生化药物分析及生物检定技术.ppt

生物检定技术 第一节 微生物限度检查 一、定义 微生物限度检查法系检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。检查项目包括细菌数、霉菌数、酵母菌数及控制菌检查。微生物限度检查应在环境洁净度10 000级下的局部洁净度100级的单向流空气区域内进行，其全过程必须严格遵守无菌操作，防止再污染。 二、检查方法 药品微生物限度检查采用活菌计数， 计数方法包括： 平皿法、薄膜过滤法。 一、平皿法 1．设备、仪器及用具 无菌室、超净工作台、恒温培养箱(室)、匀浆仪、恒温水浴箱、电热干燥箱、冰箱、高压蒸汽灭菌器、菌落计数器 (JLQ-ST或JLQ-S2型)、显微镜 (1500×)、天平 (感量0.1g)、锥形瓶、研钵 (直径10～12mm)、培养皿 (直径90mm)、量筒、试管及塞子、吸量管 (1mL、10mL)、载玻片、盖玻片、玻璃或搪瓷消毒缸 (带盖)、大橡皮乳头、小橡皮乳头、无菌衣、无菌裤、无菌帽、无菌口罩 (也可用一次性物品替代)、接种环、酒精灯 (乙醇灯)、乙醇棉球、灭菌剪刀及镊子、灭菌称样纸及不锈钢药勺、试管架、火柴、记号笔、白瓷盘、洗手盆等。 玻璃器皿均于160℃干热灭菌2h或高压蒸汽灭菌12l℃ 20min，烘干备用。 一、平皿法 2．试剂 稀释剂(pH6.8无菌磷酸盐缓冲液、pH7.6无菌磷酸盐缓冲液、0.9%无菌氯化钠溶液、pH7.0